昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2006年
5期
733-739
,共7页
刘晓光%安世恒%罗梅浩%郭线茹%原国辉
劉曉光%安世恆%囉梅浩%郭線茹%原國輝
류효광%안세항%라매호%곽선여%원국휘
烟实夜蛾%信息素结合蛋白%基因克隆%原核表达
煙實夜蛾%信息素結閤蛋白%基因剋隆%原覈錶達
연실야아%신식소결합단백%기인극륭%원핵표체
利用RT-PCR技术从烟实夜蛾Helicoverpa assulta(Hass)雄虫触角中扩增得到了信息素结合蛋白3(Hass PBP3).克隆和测序结果表明,该基因核苷酸序列全长495bp,编码164个氨基酸残基,预测分子量18.5kD.并预测N-末端疏水区包含由22个氨基酸组成的信号肽.因此,成熟蛋白应包括142个氨基酸,预测分子量为16.1 kD,等电点为5.44.经氨基酸序列同源性分析发现,此序列与已知昆虫PBP3有较高的同源性,而且具有气味结合蛋白的典型特征.将该基因重组到表达载体pGEX-4T-2中进行原核表达.经IPTG诱导、SDS-PAGE分析和Western印迹检测,结果表明烟实夜蛾PBP3基因能在大肠杆菌BL21中表达,电泳检测到一条大约42kD的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量相符.
利用RT-PCR技術從煙實夜蛾Helicoverpa assulta(Hass)雄蟲觸角中擴增得到瞭信息素結閤蛋白3(Hass PBP3).剋隆和測序結果錶明,該基因覈苷痠序列全長495bp,編碼164箇氨基痠殘基,預測分子量18.5kD.併預測N-末耑疏水區包含由22箇氨基痠組成的信號肽.因此,成熟蛋白應包括142箇氨基痠,預測分子量為16.1 kD,等電點為5.44.經氨基痠序列同源性分析髮現,此序列與已知昆蟲PBP3有較高的同源性,而且具有氣味結閤蛋白的典型特徵.將該基因重組到錶達載體pGEX-4T-2中進行原覈錶達.經IPTG誘導、SDS-PAGE分析和Western印跡檢測,結果錶明煙實夜蛾PBP3基因能在大腸桿菌BL21中錶達,電泳檢測到一條大約42kD的外源蛋白,與預測的融閤蛋白分子量相符.
이용RT-PCR기술종연실야아Helicoverpa assulta(Hass)웅충촉각중확증득도료신식소결합단백3(Hass PBP3).극륭화측서결과표명,해기인핵감산서렬전장495bp,편마164개안기산잔기,예측분자량18.5kD.병예측N-말단소수구포함유22개안기산조성적신호태.인차,성숙단백응포괄142개안기산,예측분자량위16.1 kD,등전점위5.44.경안기산서렬동원성분석발현,차서렬여이지곤충PBP3유교고적동원성,이차구유기미결합단백적전형특정.장해기인중조도표체재체pGEX-4T-2중진행원핵표체.경IPTG유도、SDS-PAGE분석화Western인적검측,결과표명연실야아PBP3기인능재대장간균BL21중표체,전영검측도일조대약42kD적외원단백,여예측적융합단백분자량상부.
