菌物学报
菌物學報
균물학보
MYCOSYSTEMA
2006年
1期
48-55
,共8页
黄勃%汪章勋%樊美珍%李增智
黃勃%汪章勛%樊美珍%李增智
황발%왕장훈%번미진%리증지
虫生真菌%粉拟青霉%类枯草杆菌蛋白酶基因%cDNA
蟲生真菌%粉擬青黴%類枯草桿菌蛋白酶基因%cDNA
충생진균%분의청매%류고초간균단백매기인%cDNA
粉拟青霉是一种常见的昆虫病原真菌,被广泛用于生物防治.根据GenBank中已登录的淡紫拟青霉,球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的类枯草杆菌蛋白酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR和3'/5'-RACE相结合的方法,首次从粉拟青霉中克隆出完整的类枯草杆菌蛋白酶cDNA基因.其全序列为2060bp,该序列5'-端和3'-端的非编码序列长度分别为209bp和252bp,开放阅读框为1599bp,编码532个氨基酸,信号肽长度为16个氨基酸.成熟蛋白的氨基酸序列和金龟子绿僵菌小孢变种(CAB63913),玉米赤霉菌(EAA68914),金龟子绿僵菌蚱蜢变种(CAC95047)及柄孢壳(AAC03564)的同源性分别为69%、71%、68%和68%.成熟蛋白具有典型的丝氨酸蛋白酶活性位点,同时有5个半胱氨酸,3个潜在的N-糖基化位点和2个可能的O-糖基化位点.该基因在的密码子第三位碱基的使用上,显示出明显的对C的偏爱.
粉擬青黴是一種常見的昆蟲病原真菌,被廣汎用于生物防治.根據GenBank中已登錄的淡紫擬青黴,毬孢白僵菌和金龜子綠僵菌的類枯草桿菌蛋白酶基因序列的同源性比較,以它們高度保守的覈苷痠序列設計一對引物,採用RT-PCR和3'/5'-RACE相結閤的方法,首次從粉擬青黴中剋隆齣完整的類枯草桿菌蛋白酶cDNA基因.其全序列為2060bp,該序列5'-耑和3'-耑的非編碼序列長度分彆為209bp和252bp,開放閱讀框為1599bp,編碼532箇氨基痠,信號肽長度為16箇氨基痠.成熟蛋白的氨基痠序列和金龜子綠僵菌小孢變種(CAB63913),玉米赤黴菌(EAA68914),金龜子綠僵菌蚱蜢變種(CAC95047)及柄孢殼(AAC03564)的同源性分彆為69%、71%、68%和68%.成熟蛋白具有典型的絲氨痠蛋白酶活性位點,同時有5箇半胱氨痠,3箇潛在的N-糖基化位點和2箇可能的O-糖基化位點.該基因在的密碼子第三位堿基的使用上,顯示齣明顯的對C的偏愛.
분의청매시일충상견적곤충병원진균,피엄범용우생물방치.근거GenBank중이등록적담자의청매,구포백강균화금구자록강균적류고초간균단백매기인서렬적동원성비교,이타문고도보수적핵감산서렬설계일대인물,채용RT-PCR화3'/5'-RACE상결합적방법,수차종분의청매중극륭출완정적류고초간균단백매cDNA기인.기전서렬위2060bp,해서렬5'-단화3'-단적비편마서렬장도분별위209bp화252bp,개방열독광위1599bp,편마532개안기산,신호태장도위16개안기산.성숙단백적안기산서렬화금구자록강균소포변충(CAB63913),옥미적매균(EAA68914),금구자록강균책맹변충(CAC95047)급병포각(AAC03564)적동원성분별위69%、71%、68%화68%.성숙단백구유전형적사안산단백매활성위점,동시유5개반광안산,3개잠재적N-당기화위점화2개가능적O-당기화위점.해기인재적밀마자제삼위감기적사용상,현시출명현적대C적편애.
