CAJ | 학술논문

为了解胚胎时期巨核细胞增殖分化特有的内在机制,本研究观察了在体外培养体系中,胎肝源CD34+造血干/祖细胞在血小板生成素(thrombopoietin,TPO)作用下增殖分化特征与相关周期蛋白B1、D1和D3表达及细胞内水平变化的关系。结果发现:(1)经12d培养后,TPO使胎肝源CD34+细胞数从1×05个细胞/ml增加到13.12±4.06×105个细胞/ml,CD41+细胞增加到了95%,CD34+细胞下降到了3%,大部分细胞的DNA倍性为2N,少数为4N,无大于4N巨核细胞,TPO对MegaCultTm-C胶原半固体培养体系中胎肝源CD34+细胞形成CFU-Mk集落产率的影响呈明显的剂量效应关系;(2)在整个培养期间,周期蛋白B1表达逐渐增加,并保持在一个高水平上,培养后期,高水平的周期蛋白B1出现在G1期细胞上;(3)周期蛋白D1和D3表达先增加,培养后期细胞内水平下降,且以G2期细胞为主。该结果提示:(1)TPO通过上调周期蛋白B1和在所有细胞周期时限上调周期蛋白D1和D3表达,促进巨核细胞祖细胞的增殖分化;(2)周期蛋白B1在G2+M期的持续高水平和周期蛋白D1和D3在G2+M期的水平下降,可能导致胎肝源巨核细胞核内有丝分裂延迟或阻滞。
위료해배태시기거핵세포증식분화특유적내재궤제,본연구관찰료재체외배양체계중,태간원CD34+조혈간/조세포재혈소판생성소(thrombopoietin,TPO)작용하증식분화특정여상관주기단백B1、D1화D3표체급세포내수평변화적관계。결과발현:(1)경12d배양후,TPO사태간원CD34+세포수종1×05개세포/ml증가도13.12±4.06×105개세포/ml,CD41+세포증가도료95%,CD34+세포하강도료3%,대부분세포적DNA배성위2N,소수위4N,무대우4N거핵세포,TPO대MegaCultTm-C효원반고체배양체계중태간원CD34+세포형성CFU-Mk집락산솔적영향정명현적제량효응관계;(2)재정개배양기간,주기단백B1표체축점증가,병보지재일개고수평상,배양후기,고수평적주기단백B1출현재G1기세포상;(3)주기단백D1화D3표체선증가,배양후기세포내수평하강,차이G2기세포위주。해결과제시:(1)TPO통과상조주기단백B1화재소유세포주기시한상조주기단백D1화D3표체,촉진거핵세포조세포적증식분화;(2)주기단백B1재G2+M기적지속고수평화주기단백D1화D3재G2+M기적수평하강,가능도치태간원거핵세포핵내유사분렬연지혹조체。