微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2001年
2期
1-7
,共7页
盛涛%张建中%阚飚%刘延清
盛濤%張建中%闞飚%劉延清
성도%장건중%감표%류연청
霍乱毒素%启动子%分泌性表达
霍亂毒素%啟動子%分泌性錶達
곽란독소%계동자%분비성표체
霍乱毒素B亚单位(CTB)在大肠杆菌表达体系中不能实现良好的分泌性表达.本文拟利用ctxb的自身启动子来实现CTB的高效分泌性表达.PCR方法扩增ctxb的调控序列和结构基因,克隆至pGEM-T载体中,并在其下游链上大肠杆菌核糖体基因的转录终止信号rmBT1T2,构建的表达质粒pGEM-T48转化大肠杆菌JM109和霍乱毒素基因阴性株霍乱弧菌IEM101.结果ctxb在自身启动子的调控下,大肠杆菌JM109和霍乱弧菌IEM101都实现了CTB的分泌性表达.但在pGEM-T48(IEM101)中CTB的分泌性表达量明显高于PGEM-T48(JM109)中的量,两者比例为50:1.因此,pGEM-T48(IEM101)表达体系是较为理想的CTB分泌性表达体系.
霍亂毒素B亞單位(CTB)在大腸桿菌錶達體繫中不能實現良好的分泌性錶達.本文擬利用ctxb的自身啟動子來實現CTB的高效分泌性錶達.PCR方法擴增ctxb的調控序列和結構基因,剋隆至pGEM-T載體中,併在其下遊鏈上大腸桿菌覈糖體基因的轉錄終止信號rmBT1T2,構建的錶達質粒pGEM-T48轉化大腸桿菌JM109和霍亂毒素基因陰性株霍亂弧菌IEM101.結果ctxb在自身啟動子的調控下,大腸桿菌JM109和霍亂弧菌IEM101都實現瞭CTB的分泌性錶達.但在pGEM-T48(IEM101)中CTB的分泌性錶達量明顯高于PGEM-T48(JM109)中的量,兩者比例為50:1.因此,pGEM-T48(IEM101)錶達體繫是較為理想的CTB分泌性錶達體繫.
곽란독소B아단위(CTB)재대장간균표체체계중불능실현량호적분비성표체.본문의이용ctxb적자신계동자래실현CTB적고효분비성표체.PCR방법확증ctxb적조공서렬화결구기인,극륭지pGEM-T재체중,병재기하유련상대장간균핵당체기인적전록종지신호rmBT1T2,구건적표체질립pGEM-T48전화대장간균JM109화곽란독소기인음성주곽란호균IEM101.결과ctxb재자신계동자적조공하,대장간균JM109화곽란호균IEM101도실현료CTB적분비성표체.단재pGEM-T48(IEM101)중CTB적분비성표체량명현고우PGEM-T48(JM109)중적량,량자비례위50:1.인차,pGEM-T48(IEM101)표체체계시교위이상적CTB분비성표체체계.
