中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2002年
4期
197-200
,共4页
刘冬梅%张卓远%王妍%孟洪琪
劉鼕梅%張卓遠%王妍%孟洪琪
류동매%장탁원%왕연%맹홍기
GM-CSF IL-2 融合蛋白 分泌表达
GM-CSF IL-2 融閤蛋白 分泌錶達
GM-CSF IL-2 융합단백 분비표체
目的将GM-CSF基因与IL-2基因通过一中间接头G-G-G-S-G-G-S-G连接到一起,并在E.coli中分泌表达具有更高GM-CSF和IL-2生物活性的融合蛋白分子.方法在引物设计中,通过选择密码子,在Linker的中前部设计了一个BamHI酶切位点,GM-CSF的下游引物和IL-2的上游引物均起始于该位点.然后通过PCR、酶切、连接等一系列分子克隆的方法,构建融合蛋白的克隆及表达载体.结果经EcoRI/SaII双酶切鉴定,克隆载体pUC19GM-CSF/L/IL-2及表达载体pBVGMCSF/L/IL-2中均插入了正确的外源片段.结论克隆及表达载体的成功构建,为进一步表达融合蛋白及活性研究打下了基础.
目的將GM-CSF基因與IL-2基因通過一中間接頭G-G-G-S-G-G-S-G連接到一起,併在E.coli中分泌錶達具有更高GM-CSF和IL-2生物活性的融閤蛋白分子.方法在引物設計中,通過選擇密碼子,在Linker的中前部設計瞭一箇BamHI酶切位點,GM-CSF的下遊引物和IL-2的上遊引物均起始于該位點.然後通過PCR、酶切、連接等一繫列分子剋隆的方法,構建融閤蛋白的剋隆及錶達載體.結果經EcoRI/SaII雙酶切鑒定,剋隆載體pUC19GM-CSF/L/IL-2及錶達載體pBVGMCSF/L/IL-2中均插入瞭正確的外源片段.結論剋隆及錶達載體的成功構建,為進一步錶達融閤蛋白及活性研究打下瞭基礎.
목적장GM-CSF기인여IL-2기인통과일중간접두G-G-G-S-G-G-S-G련접도일기,병재E.coli중분비표체구유경고GM-CSF화IL-2생물활성적융합단백분자.방법재인물설계중,통과선택밀마자,재Linker적중전부설계료일개BamHI매절위점,GM-CSF적하유인물화IL-2적상유인물균기시우해위점.연후통과PCR、매절、련접등일계렬분자극륭적방법,구건융합단백적극륭급표체재체.결과경EcoRI/SaII쌍매절감정,극륭재체pUC19GM-CSF/L/IL-2급표체재체pBVGMCSF/L/IL-2중균삽입료정학적외원편단.결론극륭급표체재체적성공구건,위진일보표체융합단백급활성연구타하료기출.
