解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2002年
8期
711-713
,共3页
聚合酶链反应%三甲基甘氨酸%模板
聚閤酶鏈反應%三甲基甘氨痠%模闆
취합매련반응%삼갑기감안산%모판
为探讨三甲基甘氨酸等有机溶剂对G+C碱基丰富基因PCR扩增困难的影响, 分别用标准PCR和添加有甘油、二甲基亚砜(DMSO)、甲酰胺及三甲基甘氨酸的改进型PCR对G+C含量为70%的周期蛋白依赖性激酶抑制剂基因(ARF)和G+C含量为90%的胰岛素样生长因子受体Ⅱ (IGFR Ⅱ)进行扩增.结果显示,应用标准PCR及添加有甘油或甲酰胺的PCR均不能特异性扩出上述两基因;加入10% DMSO虽可扩出ARF基因但同时有非特异性产物;而加入三甲基甘氨酸可特异地扩增出642bp的ARF和540bp的IGFR Ⅱ基因.表明三甲基甘氨酸可消除G+C丰富DNA区域二级结构对PCR扩增的干扰,明显促进这类基因的PCR扩增.
為探討三甲基甘氨痠等有機溶劑對G+C堿基豐富基因PCR擴增睏難的影響, 分彆用標準PCR和添加有甘油、二甲基亞砜(DMSO)、甲酰胺及三甲基甘氨痠的改進型PCR對G+C含量為70%的週期蛋白依賴性激酶抑製劑基因(ARF)和G+C含量為90%的胰島素樣生長因子受體Ⅱ (IGFR Ⅱ)進行擴增.結果顯示,應用標準PCR及添加有甘油或甲酰胺的PCR均不能特異性擴齣上述兩基因;加入10% DMSO雖可擴齣ARF基因但同時有非特異性產物;而加入三甲基甘氨痠可特異地擴增齣642bp的ARF和540bp的IGFR Ⅱ基因.錶明三甲基甘氨痠可消除G+C豐富DNA區域二級結構對PCR擴增的榦擾,明顯促進這類基因的PCR擴增.
위탐토삼갑기감안산등유궤용제대G+C감기봉부기인PCR확증곤난적영향, 분별용표준PCR화첨가유감유、이갑기아풍(DMSO)、갑선알급삼갑기감안산적개진형PCR대G+C함량위70%적주기단백의뢰성격매억제제기인(ARF)화G+C함량위90%적이도소양생장인자수체Ⅱ (IGFR Ⅱ)진행확증.결과현시,응용표준PCR급첨가유감유혹갑선알적PCR균불능특이성확출상술량기인;가입10% DMSO수가확출ARF기인단동시유비특이성산물;이가입삼갑기감안산가특이지확증출642bp적ARF화540bp적IGFR Ⅱ기인.표명삼갑기감안산가소제G+C봉부DNA구역이급결구대PCR확증적간우,명현촉진저류기인적PCR확증.
