生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2003年
5期
5-6
,共2页
杨立泉%吴文芳%时成波%吕安国%冯家勋%柏学亮
楊立泉%吳文芳%時成波%呂安國%馮傢勛%柏學亮
양립천%오문방%시성파%려안국%풍가훈%백학량
金黄色葡萄球菌肠毒素A基因%基因突变%基因表达
金黃色葡萄毬菌腸毒素A基因%基因突變%基因錶達
금황색포도구균장독소A기인%기인돌변%기인표체
目的:金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227ala基因的克隆及表达.方法:利用错配PCR方法,从含有金黄色葡萄球菌肠毒素A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)基因的质粒中扩增出约720bp的DNA片段,将其克隆到表达载体7ZTS中,并转化于JM109(DE3).结果:重组质粒的测序结果表明,它含有702bp(不包括N端72bp的信号肽编码区),其核苷酸序列与文献报道完全一致,推导的氨基酸序列显示227位的天冬氨酸已突变为丙氨酸.结论:该基因所表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占总蛋白51.5%.表达的蛋白与天然肠毒素A产生的抗体能发生凝集作用,具有与天然SEA类同的抗原活性.
目的:金黃色葡萄毬菌腸毒素A Asp227ala基因的剋隆及錶達.方法:利用錯配PCR方法,從含有金黃色葡萄毬菌腸毒素A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)基因的質粒中擴增齣約720bp的DNA片段,將其剋隆到錶達載體7ZTS中,併轉化于JM109(DE3).結果:重組質粒的測序結果錶明,它含有702bp(不包括N耑72bp的信號肽編碼區),其覈苷痠序列與文獻報道完全一緻,推導的氨基痠序列顯示227位的天鼕氨痠已突變為丙氨痠.結論:該基因所錶達的蛋白為可溶性蛋白,錶達量佔總蛋白51.5%.錶達的蛋白與天然腸毒素A產生的抗體能髮生凝集作用,具有與天然SEA類同的抗原活性.
목적:금황색포도구균장독소A Asp227ala기인적극륭급표체.방법:이용착배PCR방법,종함유금황색포도구균장독소A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)기인적질립중확증출약720bp적DNA편단,장기극륭도표체재체7ZTS중,병전화우JM109(DE3).결과:중조질립적측서결과표명,타함유702bp(불포괄N단72bp적신호태편마구),기핵감산서렬여문헌보도완전일치,추도적안기산서렬현시227위적천동안산이돌변위병안산.결론:해기인소표체적단백위가용성단백,표체량점총단백51.5%.표체적단백여천연장독소A산생적항체능발생응집작용,구유여천연SEA류동적항원활성.
