生物医学工程学杂志
生物醫學工程學雜誌
생물의학공정학잡지
2008年
3期
642-646
,共5页
程赛宇%阮怀珍%杨忠%吴喜贵
程賽宇%阮懷珍%楊忠%吳喜貴
정새우%원부진%양충%오희귀
胶质细胞源性神经营养因子%逆转录病毒载体%基因重组%神经干细胞
膠質細胞源性神經營養因子%逆轉錄病毒載體%基因重組%神經榦細胞
효질세포원성신경영양인자%역전록병독재체%기인중조%신경간세포
应用基因重组技术将大鼠GDNF cDNA克隆到逆转录病毒载体pLXSN中,经酶切及PCR对重组质粒进行鉴定.将重组体包装到PA317细胞中,并感染增殖旺盛的大鼠神经干细胞,通过免疫细胞化学、RT-PCR和western-blot等方法鉴定转染效率.结果显示GDNF cDNA正确地克隆到逆转录病毒载体pLXSN中,该真核细胞表达载体成功转染增殖旺盛的神经干细胞并有效表达.因此本研究成功构建了GDNF真核细胞表达载体,并成功转染到神经干细胞中.为移植替代和基因治疗神经系统疾病提供了实验基础.
應用基因重組技術將大鼠GDNF cDNA剋隆到逆轉錄病毒載體pLXSN中,經酶切及PCR對重組質粒進行鑒定.將重組體包裝到PA317細胞中,併感染增殖旺盛的大鼠神經榦細胞,通過免疫細胞化學、RT-PCR和western-blot等方法鑒定轉染效率.結果顯示GDNF cDNA正確地剋隆到逆轉錄病毒載體pLXSN中,該真覈細胞錶達載體成功轉染增殖旺盛的神經榦細胞併有效錶達.因此本研究成功構建瞭GDNF真覈細胞錶達載體,併成功轉染到神經榦細胞中.為移植替代和基因治療神經繫統疾病提供瞭實驗基礎.
응용기인중조기술장대서GDNF cDNA극륭도역전록병독재체pLXSN중,경매절급PCR대중조질립진행감정.장중조체포장도PA317세포중,병감염증식왕성적대서신경간세포,통과면역세포화학、RT-PCR화western-blot등방법감정전염효솔.결과현시GDNF cDNA정학지극륭도역전록병독재체pLXSN중,해진핵세포표체재체성공전염증식왕성적신경간세포병유효표체.인차본연구성공구건료GDNF진핵세포표체재체,병성공전염도신경간세포중.위이식체대화기인치료신경계통질병제공료실험기출.
