中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2008年
7期
6-10
,共5页
慢病毒载体%成纤维细胞%绿色荧光蛋白
慢病毒載體%成纖維細胞%綠色熒光蛋白
만병독재체%성섬유세포%록색형광단백
试验尝试建立稳定表达外源基因的人成纤维细胞系.取成年男性包皮皮肤的皮下组织,分离培养人皮肤成纤维细胞,分别采用脂质体和慢病毒载体介导转染人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白.结果显示,来自成年人包皮皮下组织的成纤维细胞呈梭形,具有快速的增殖和稳定的生长性能.脂质体介导转染的人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白表达不稳定,阳性细胞表达率低.转染后的人成纤维细胞变得更为细长,细胞生长速度降低.慢病毒栽体介导人皮肤成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白,转染后细胞生长性能和形态没有变化,经过多次传代和冻存复苏对人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白的表达没有影响,通过流式细胞仪对慢病毒介导表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞检测显示,绿色荧光蛋白表达阳性率为99.85%,并且表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞细胞均一程度为76.05%.试验证实了慢病毒栽体能够高效稳定介导人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白.
試驗嘗試建立穩定錶達外源基因的人成纖維細胞繫.取成年男性包皮皮膚的皮下組織,分離培養人皮膚成纖維細胞,分彆採用脂質體和慢病毒載體介導轉染人皮膚成纖維細胞錶達綠色熒光蛋白.結果顯示,來自成年人包皮皮下組織的成纖維細胞呈梭形,具有快速的增殖和穩定的生長性能.脂質體介導轉染的人皮膚成纖維細胞綠色熒光蛋白錶達不穩定,暘性細胞錶達率低.轉染後的人成纖維細胞變得更為細長,細胞生長速度降低.慢病毒栽體介導人皮膚成纖維細胞高效穩定錶達綠色熒光蛋白,轉染後細胞生長性能和形態沒有變化,經過多次傳代和凍存複囌對人皮膚成纖維細胞綠色熒光蛋白的錶達沒有影響,通過流式細胞儀對慢病毒介導錶達綠色熒光蛋白的人皮膚成纖維細胞檢測顯示,綠色熒光蛋白錶達暘性率為99.85%,併且錶達綠色熒光蛋白的人皮膚成纖維細胞細胞均一程度為76.05%.試驗證實瞭慢病毒栽體能夠高效穩定介導人皮膚成纖維細胞錶達綠色熒光蛋白.
시험상시건립은정표체외원기인적인성섬유세포계.취성년남성포피피부적피하조직,분리배양인피부성섬유세포,분별채용지질체화만병독재체개도전염인피부성섬유세포표체록색형광단백.결과현시,래자성년인포피피하조직적성섬유세포정사형,구유쾌속적증식화은정적생장성능.지질체개도전염적인피부성섬유세포록색형광단백표체불은정,양성세포표체솔저.전염후적인성섬유세포변득경위세장,세포생장속도강저.만병독재체개도인피부성섬유세포고효은정표체록색형광단백,전염후세포생장성능화형태몰유변화,경과다차전대화동존복소대인피부성섬유세포록색형광단백적표체몰유영향,통과류식세포의대만병독개도표체록색형광단백적인피부성섬유세포검측현시,록색형광단백표체양성솔위99.85%,병차표체록색형광단백적인피부성섬유세포세포균일정도위76.05%.시험증실료만병독재체능구고효은정개도인피부성섬유세포표체록색형광단백.
