贵阳医学院学报
貴暘醫學院學報
귀양의학원학보
JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE
2009年
1期
5-8
,共4页
陈登宇%刘芸%钟田雨%王蔚%赵明哲%刘靖华%姜勇
陳登宇%劉蕓%鐘田雨%王蔚%趙明哲%劉靖華%薑勇
진등우%류예%종전우%왕위%조명철%류정화%강용
基因,bcl-2%Hela细胞%线粒体%荧光免疫测定%细胞内定位
基因,bcl-2%Hela細胞%線粒體%熒光免疫測定%細胞內定位
기인,bcl-2%Hela세포%선립체%형광면역측정%세포내정위
目的:构建BNIP3-HA融合蛋白的真核表达载体,观察BNIP3在Hela细胞中表达及其定位.方法:采用两步克隆法将HA和BNIP3的编码序列以融合表达的形式克隆到载体pcDNA3上,随后转染Hela细胞.BNIP3经AlexaFluor 488免疫荧光标记,线粒体用MitoFluor Red 589染色后在荧光显微镜下观察BNIP3的表达和定位.结果:重组质粒经酶切、聚合酶链反应(PCR) 和测序鉴定构建正确,并在Hela细胞中能够表达,在荧光显微镜下观察,BNIP3-HA融合蛋白分布于线粒体.结论:成功构建BNIP3-HA融合蛋白表达载体并在Hela细胞线粒体中表达.
目的:構建BNIP3-HA融閤蛋白的真覈錶達載體,觀察BNIP3在Hela細胞中錶達及其定位.方法:採用兩步剋隆法將HA和BNIP3的編碼序列以融閤錶達的形式剋隆到載體pcDNA3上,隨後轉染Hela細胞.BNIP3經AlexaFluor 488免疫熒光標記,線粒體用MitoFluor Red 589染色後在熒光顯微鏡下觀察BNIP3的錶達和定位.結果:重組質粒經酶切、聚閤酶鏈反應(PCR) 和測序鑒定構建正確,併在Hela細胞中能夠錶達,在熒光顯微鏡下觀察,BNIP3-HA融閤蛋白分佈于線粒體.結論:成功構建BNIP3-HA融閤蛋白錶達載體併在Hela細胞線粒體中錶達.
목적:구건BNIP3-HA융합단백적진핵표체재체,관찰BNIP3재Hela세포중표체급기정위.방법:채용량보극륭법장HA화BNIP3적편마서렬이융합표체적형식극륭도재체pcDNA3상,수후전염Hela세포.BNIP3경AlexaFluor 488면역형광표기,선립체용MitoFluor Red 589염색후재형광현미경하관찰BNIP3적표체화정위.결과:중조질립경매절、취합매련반응(PCR) 화측서감정구건정학,병재Hela세포중능구표체,재형광현미경하관찰,BNIP3-HA융합단백분포우선립체.결론:성공구건BNIP3-HA융합단백표체재체병재Hela세포선립체중표체.
