青海医学院学报
青海醫學院學報
청해의학원학보
JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE
2009年
1期
9-13
,共5页
谢保胜%段瑞君%藤原滋树
謝保勝%段瑞君%籐原滋樹
사보성%단서군%등원자수
斑马鱼%促性腺激素释放激素%克隆%基因表达
斑馬魚%促性腺激素釋放激素%剋隆%基因錶達
반마어%촉성선격소석방격소%극륭%기인표체
目的 克隆斑马鱼促性腺激素释放激素(GnRH)基因,构建重组质粒pQE30-GnRH并获得表达蛋白.方法 从斑马鱼脑组织提取总RNA,应用RT-PCR方法获得斑马鱼GnRH cDNA.将该cDNA插入质粒pQE30中,并使其在大肠杆菌RB791中表达.经IPTG诱导后SDS-PAGE电泳检测蛋白的表达情况.结果 斑马鱼GnRH cDNA长为207bp,编码的GnRH前体为69个氨基酸残基.与鲤鱼、鲫鱼、拟鲤、黑头软口鲦等淡水鲤科鱼类的氨基酸序列同源性比较,分别为74.4%,69.8%,73.3% 和 73.3%.电泳结果显示一新的分子量约为14.4 kDa的特异蛋白带.结论 本研究所克隆的斑马鱼GnRH基因属于GnRH-Ⅱ.构建斑马鱼GnRH原核表达质粒不仅获得大量的GnRH蛋白,还可对该蛋白做进一步分离纯化以及生物活性方面的研究.
目的 剋隆斑馬魚促性腺激素釋放激素(GnRH)基因,構建重組質粒pQE30-GnRH併穫得錶達蛋白.方法 從斑馬魚腦組織提取總RNA,應用RT-PCR方法穫得斑馬魚GnRH cDNA.將該cDNA插入質粒pQE30中,併使其在大腸桿菌RB791中錶達.經IPTG誘導後SDS-PAGE電泳檢測蛋白的錶達情況.結果 斑馬魚GnRH cDNA長為207bp,編碼的GnRH前體為69箇氨基痠殘基.與鯉魚、鯽魚、擬鯉、黑頭軟口鰷等淡水鯉科魚類的氨基痠序列同源性比較,分彆為74.4%,69.8%,73.3% 和 73.3%.電泳結果顯示一新的分子量約為14.4 kDa的特異蛋白帶.結論 本研究所剋隆的斑馬魚GnRH基因屬于GnRH-Ⅱ.構建斑馬魚GnRH原覈錶達質粒不僅穫得大量的GnRH蛋白,還可對該蛋白做進一步分離純化以及生物活性方麵的研究.
목적 극륭반마어촉성선격소석방격소(GnRH)기인,구건중조질립pQE30-GnRH병획득표체단백.방법 종반마어뇌조직제취총RNA,응용RT-PCR방법획득반마어GnRH cDNA.장해cDNA삽입질립pQE30중,병사기재대장간균RB791중표체.경IPTG유도후SDS-PAGE전영검측단백적표체정황.결과 반마어GnRH cDNA장위207bp,편마적GnRH전체위69개안기산잔기.여리어、즉어、의리、흑두연구조등담수리과어류적안기산서렬동원성비교,분별위74.4%,69.8%,73.3% 화 73.3%.전영결과현시일신적분자량약위14.4 kDa적특이단백대.결론 본연구소극륭적반마어GnRH기인속우GnRH-Ⅱ.구건반마어GnRH원핵표체질립불부획득대량적GnRH단백,환가대해단백주진일보분리순화이급생물활성방면적연구.
