医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2010年
5期
388-394
,共7页
杨漾%肖敏%许思苗%龚泉%姜立军%周剑峰
楊漾%肖敏%許思苗%龔泉%薑立軍%週劍峰
양양%초민%허사묘%공천%강립군%주검봉
丰加霉素%K562细胞%集落形成%G0/G1期阻滞%P16蛋白
豐加黴素%K562細胞%集落形成%G0/G1期阻滯%P16蛋白
봉가매소%K562세포%집락형성%G0/G1기조체%P16단백
目的 初步探讨低浓度丰加霉素对人白血病K562细胞集落形成抑制作用的机制.方法 甲基纤维素集落形成实验检测低浓度丰加霉素对人白血病K562细胞集落形成能力的影响;CCK-8法检测低浓度丰加霉素对K562细胞的生长抑制率;AnnexinV/PI双染流式细胞仪检测低浓度丰加霉素作用下的K562细胞凋亡率;PI 单染流式细胞仪检测药物作用后细胞的周期分布改变;Western免疫印迹和实时定量PCR检测周期相关分子表达水平变化.结果 低浓度丰加霉素对人白血病K562细胞具有较强的集落形成抑制作用;可明显抑制K562细胞的生长,呈时间-剂量依赖性;尽管短时间(48 h)的药物处理仅出现轻度的细胞凋亡和周期阻滞,但10 nmol/L和30 nmol/L的丰加霉素长时间(7 d)作用后,K562细胞G0/G1期比例分别是(62.3±1.7)%和(76.9±0.7)%,与对照组(38.9±1.1)%相比差异具有高度统计学意义(P<0.01);低浓度丰加霉素长时间作用后诱导K562细胞周期相关分子P16蛋白水平和转录水平的高表达.结论 丰加霉素在低浓度,长时间作用于人白血病K562细胞后,具有较强的集落形成抑制和生长抑制作用,此作用可能与诱导细胞周期相关分子p16高表达,导致细胞G0/G1期阻滞有关.
目的 初步探討低濃度豐加黴素對人白血病K562細胞集落形成抑製作用的機製.方法 甲基纖維素集落形成實驗檢測低濃度豐加黴素對人白血病K562細胞集落形成能力的影響;CCK-8法檢測低濃度豐加黴素對K562細胞的生長抑製率;AnnexinV/PI雙染流式細胞儀檢測低濃度豐加黴素作用下的K562細胞凋亡率;PI 單染流式細胞儀檢測藥物作用後細胞的週期分佈改變;Western免疫印跡和實時定量PCR檢測週期相關分子錶達水平變化.結果 低濃度豐加黴素對人白血病K562細胞具有較彊的集落形成抑製作用;可明顯抑製K562細胞的生長,呈時間-劑量依賴性;儘管短時間(48 h)的藥物處理僅齣現輕度的細胞凋亡和週期阻滯,但10 nmol/L和30 nmol/L的豐加黴素長時間(7 d)作用後,K562細胞G0/G1期比例分彆是(62.3±1.7)%和(76.9±0.7)%,與對照組(38.9±1.1)%相比差異具有高度統計學意義(P<0.01);低濃度豐加黴素長時間作用後誘導K562細胞週期相關分子P16蛋白水平和轉錄水平的高錶達.結論 豐加黴素在低濃度,長時間作用于人白血病K562細胞後,具有較彊的集落形成抑製和生長抑製作用,此作用可能與誘導細胞週期相關分子p16高錶達,導緻細胞G0/G1期阻滯有關.
목적 초보탐토저농도봉가매소대인백혈병K562세포집락형성억제작용적궤제.방법 갑기섬유소집락형성실험검측저농도봉가매소대인백혈병K562세포집락형성능력적영향;CCK-8법검측저농도봉가매소대K562세포적생장억제솔;AnnexinV/PI쌍염류식세포의검측저농도봉가매소작용하적K562세포조망솔;PI 단염류식세포의검측약물작용후세포적주기분포개변;Western면역인적화실시정량PCR검측주기상관분자표체수평변화.결과 저농도봉가매소대인백혈병K562세포구유교강적집락형성억제작용;가명현억제K562세포적생장,정시간-제량의뢰성;진관단시간(48 h)적약물처리부출현경도적세포조망화주기조체,단10 nmol/L화30 nmol/L적봉가매소장시간(7 d)작용후,K562세포G0/G1기비례분별시(62.3±1.7)%화(76.9±0.7)%,여대조조(38.9±1.1)%상비차이구유고도통계학의의(P<0.01);저농도봉가매소장시간작용후유도K562세포주기상관분자P16단백수평화전록수평적고표체.결론 봉가매소재저농도,장시간작용우인백혈병K562세포후,구유교강적집락형성억제화생장억제작용,차작용가능여유도세포주기상관분자p16고표체,도치세포G0/G1기조체유관.