山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2007年
6期
577-581,594
,共6页
主余华%李肖红%张春清%任万华%赵幼安%马艳丽
主餘華%李肖紅%張春清%任萬華%趙幼安%馬豔麗
주여화%리초홍%장춘청%임만화%조유안%마염려
RNA干扰%短发夹RNA%转化生长因子β%结缔组织生长因子%肝纤维化
RNA榦擾%短髮夾RNA%轉化生長因子β%結締組織生長因子%肝纖維化
RNA간우%단발협RNA%전화생장인자β%결체조직생장인자%간섬유화
目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对肝星状细胞(HSC-T6)中TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因表达及细胞外基质分泌的影响 .方法:将已构建并筛选有效含绿色荧光蛋白(EGFP)的CTGFshRNA质粒以转染试剂Metafec tene转染HSC-T6,另设空质粒组、只加Metafectene组及空白对照组,24 h及48 h后,用 RT- PCR法检测各组细胞中TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA的表达;放免法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白的含量;流式细胞仪分析转染效率.结果:CTGFshRNA质粒在肝星状细胞的转染效率24 h、48 h分别为(60±5)% 、(42±3)%;与空白对照组相比,空质粒组、脂质体组对基因表达及细胞外基质的分泌均无影响,而CTGFshRNA 能明显抑制CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA的表达,降低上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白的含量(P＜0.01或P＜0.05),而对TGF-β1的基因表达则无影响 .结论: CTGFshRNA可明显抑制肝星状细胞CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因表达及细胞外基质的分泌.
目的:研究結締組織生長因子(CTGF)短髮夾RNA(short hairpin RNA,shRNA)對肝星狀細胞(HSC-T6)中TGF-β1、CTGF、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原基因錶達及細胞外基質分泌的影響 .方法:將已構建併篩選有效含綠色熒光蛋白(EGFP)的CTGFshRNA質粒以轉染試劑Metafec tene轉染HSC-T6,另設空質粒組、隻加Metafectene組及空白對照組,24 h及48 h後,用 RT- PCR法檢測各組細胞中TGF-β1、CTGF、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原mRNA的錶達;放免法分析細胞上清液中Ⅲ型前膠原、Ⅳ型膠原、透明質痠和層粘連蛋白的含量;流式細胞儀分析轉染效率.結果:CTGFshRNA質粒在肝星狀細胞的轉染效率24 h、48 h分彆為(60±5)% 、(42±3)%;與空白對照組相比,空質粒組、脂質體組對基因錶達及細胞外基質的分泌均無影響,而CTGFshRNA 能明顯抑製CTGF、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原mRNA的錶達,降低上清液中Ⅲ型前膠原、Ⅳ型膠原、透明質痠和層粘連蛋白的含量(P＜0.01或P＜0.05),而對TGF-β1的基因錶達則無影響 .結論: CTGFshRNA可明顯抑製肝星狀細胞CTGF、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原基因錶達及細胞外基質的分泌.
목적:연구결체조직생장인자(CTGF)단발협RNA(short hairpin RNA,shRNA)대간성상세포(HSC-T6)중TGF-β1、CTGF、Ⅰ형효원、Ⅲ형효원기인표체급세포외기질분비적영향 .방법:장이구건병사선유효함록색형광단백(EGFP)적CTGFshRNA질립이전염시제Metafec tene전염HSC-T6,령설공질립조、지가Metafectene조급공백대조조,24 h급48 h후,용 RT- PCR법검측각조세포중TGF-β1、CTGF、Ⅰ형효원、Ⅲ형효원mRNA적표체;방면법분석세포상청액중Ⅲ형전효원、Ⅳ형효원、투명질산화층점련단백적함량;류식세포의분석전염효솔.결과:CTGFshRNA질립재간성상세포적전염효솔24 h、48 h분별위(60±5)% 、(42±3)%;여공백대조조상비,공질립조、지질체조대기인표체급세포외기질적분비균무영향,이CTGFshRNA 능명현억제CTGF、Ⅰ형효원、Ⅲ형효원mRNA적표체,강저상청액중Ⅲ형전효원、Ⅳ형효원、투명질산화층점련단백적함량(P＜0.01혹P＜0.05),이대TGF-β1적기인표체칙무영향 .결론: CTGFshRNA가명현억제간성상세포CTGF、Ⅰ형효원、Ⅲ형효원기인표체급세포외기질적분비.
