中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2008年
6期
549-553
,共5页
张俊%王爱东%申咏梅%石怡珍%崔学军%刘增礼%欧阳松应
張俊%王愛東%申詠梅%石怡珍%崔學軍%劉增禮%歐暘鬆應
장준%왕애동%신영매%석이진%최학군%류증례%구양송응
钠碘转运体(hMs)%端粒酶逆转录酶(hTERT)%重组腺病毒%核心启动子
鈉碘轉運體(hMs)%耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)%重組腺病毒%覈心啟動子
납전전운체(hMs)%단립매역전록매(hTERT)%중조선병독%핵심계동자
目的:构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)核心启动子调控的人钠碘转运体(hNIS)基因重组腺病毒,并初步鉴定.方法:将hTERT核心启动子从hTERT/pcDNA3.1(+)质粒中切出,亚克隆至含全长hNIS cDNA序列的质粒载体FL*-hNIS/pcDNA3,应用限制性内切酶将hTERT-hNIS片段切出后连入穿梭质粒载体pAdTrack,应用AdEasy系统构建出重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS.同时,构建CMV启动子调控的hNIS重组腺病毒Ad-CMV-hNIS作为阳性对照.应用RT-PCR方法验证hTERT在转染肿瘤细胞中的转录活性.结果:成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS并经PCR验证正确.RT-PCR证实hNIScDNA能从Ad-hTERT-hNIS转染的细胞中扩增出来.结论:成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-KNIS;hTERT核心启动子在转染的肺癌A549细胞中具有转录活性.为下一步的碘治疗实验提供了实验依据.
目的:構建含人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)覈心啟動子調控的人鈉碘轉運體(hNIS)基因重組腺病毒,併初步鑒定.方法:將hTERT覈心啟動子從hTERT/pcDNA3.1(+)質粒中切齣,亞剋隆至含全長hNIS cDNA序列的質粒載體FL*-hNIS/pcDNA3,應用限製性內切酶將hTERT-hNIS片段切齣後連入穿梭質粒載體pAdTrack,應用AdEasy繫統構建齣重組腺病毒Ad-hTERT-hNIS.同時,構建CMV啟動子調控的hNIS重組腺病毒Ad-CMV-hNIS作為暘性對照.應用RT-PCR方法驗證hTERT在轉染腫瘤細胞中的轉錄活性.結果:成功構建重組腺病毒Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS併經PCR驗證正確.RT-PCR證實hNIScDNA能從Ad-hTERT-hNIS轉染的細胞中擴增齣來.結論:成功構建重組腺病毒Ad-hTERT-KNIS;hTERT覈心啟動子在轉染的肺癌A549細胞中具有轉錄活性.為下一步的碘治療實驗提供瞭實驗依據.
목적:구건함인단립매역전록매(hTERT)핵심계동자조공적인납전전운체(hNIS)기인중조선병독,병초보감정.방법:장hTERT핵심계동자종hTERT/pcDNA3.1(+)질립중절출,아극륭지함전장hNIS cDNA서렬적질립재체FL*-hNIS/pcDNA3,응용한제성내절매장hTERT-hNIS편단절출후련입천사질립재체pAdTrack,응용AdEasy계통구건출중조선병독Ad-hTERT-hNIS.동시,구건CMV계동자조공적hNIS중조선병독Ad-CMV-hNIS작위양성대조.응용RT-PCR방법험증hTERT재전염종류세포중적전록활성.결과:성공구건중조선병독Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS병경PCR험증정학.RT-PCR증실hNIScDNA능종Ad-hTERT-hNIS전염적세포중확증출래.결론:성공구건중조선병독Ad-hTERT-KNIS;hTERT핵심계동자재전염적폐암A549세포중구유전록활성.위하일보적전치료실험제공료실험의거.
