分泌型碱性磷酸酶示踪的TA克隆真核表达载体的构建
분비형감성린산매시종적TA극륭진핵표체재체적구건
Construction of secreted alkaline phosphatase traced and eukaryotic expressed TA cloning vector
  • 万方数据
    北京医学 북경의학
    BEIJING MEDICAL JOURNAL
    2010年 6期 443-446 ,共4页

    张洪海%计云霞%孙玉%张玉林%乔录新%崔丹%陈德喜

    장홍해%계운하%손옥%장옥림%교록신%최단%진덕희

    T载体%真核表达%载体构建 T載體%真覈錶達%載體構建
    T재체%진핵표체%재체구건
    目的 制备具有分泌型碱性磷酸酶示踪作用和真核表达功能的TA克隆载体.方法 把CMV启动子区-TA克隆位点-BGH多聚腺苷酸区序列克隆到pSEAP2-control载体中,构建成具有真核表达功能并外分泌碱性磷酸酶(SEAP)的pcDNA5AP-前T载体.增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆到pcDNA5AP-T载体上并进行EGFP表达分析和SEAP活性检测.结果 pcDNA5AP-EGFP以400ng/孔转染6孔板293T细胞,EGFP表达率达50%,SEAP活性比对照组高20倍.结论 成功构建了具有真核表达功能并外分泌碱性磷酸酶的pcDNA5AP-T载体.
    목적 제비구유분비형감성린산매시종작용화진핵표체공능적TA극륭재체.방법 파CMV계동자구-TA극륭위점-BGH다취선감산구서렬극륭도pSEAP2-control재체중,구건성구유진핵표체공능병외분비감성린산매(SEAP)적pcDNA5AP-전T재체.증강형록색형광단백(EGFP)기인극륭도pcDNA5AP-T재체상병진행EGFP표체분석화SEAP활성검측.결과 pcDNA5AP-EGFP이400ng/공전염6공판293T세포,EGFP표체솔체50%,SEAP활성비대조조고20배.결론 성공구건료구유진핵표체공능병외분비감성린산매적pcDNA5AP-T재체.
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