西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2011年
1期
27-32
,共6页
王微%杨晓伶%杨婧%程舟%朱云国%李珊
王微%楊曉伶%楊婧%程舟%硃雲國%李珊
왕미%양효령%양청%정주%주운국%리산
大花蕙兰%根癌农杆菌%遗传转化%类原球茎
大花蕙蘭%根癌農桿菌%遺傳轉化%類原毬莖
대화혜란%근암농간균%유전전화%류원구경
以大花蕙兰原球茎(PLBs)为外植体,采用EHA105和LBA4404 2种根癌农杆菌菌株与pCAMBIA1301质粒构建工程菌介导,以建立大花蕙兰遗传转化体系,并比较不同受体处理方式、菌液浓度和侵染方式等对大花蕙兰转化的影响.结果表明:(1)以切成3 mm左右的PLBs小块作为受体材料,用OD600值为0.6的LBA4404根癌农杆菌菌株,并用MS+1.0 mg/L BA+200 μmol/L AS(乙酰丁香酮)的液体培养基将菌液等体积稀释侵染,转化率可达62.5%.(2)大花蕙兰对潮霉素(Hyg)十分敏感,5 mg/L Hyg对转化后的PLBs有较好的筛选效果,筛选后最高成活率为13.0%.(3)PCR检测初步证明,通过根癌农杆菌介导的方法获得了2株转基因大花蕙兰植株.
以大花蕙蘭原毬莖(PLBs)為外植體,採用EHA105和LBA4404 2種根癌農桿菌菌株與pCAMBIA1301質粒構建工程菌介導,以建立大花蕙蘭遺傳轉化體繫,併比較不同受體處理方式、菌液濃度和侵染方式等對大花蕙蘭轉化的影響.結果錶明:(1)以切成3 mm左右的PLBs小塊作為受體材料,用OD600值為0.6的LBA4404根癌農桿菌菌株,併用MS+1.0 mg/L BA+200 μmol/L AS(乙酰丁香酮)的液體培養基將菌液等體積稀釋侵染,轉化率可達62.5%.(2)大花蕙蘭對潮黴素(Hyg)十分敏感,5 mg/L Hyg對轉化後的PLBs有較好的篩選效果,篩選後最高成活率為13.0%.(3)PCR檢測初步證明,通過根癌農桿菌介導的方法穫得瞭2株轉基因大花蕙蘭植株.
이대화혜란원구경(PLBs)위외식체,채용EHA105화LBA4404 2충근암농간균균주여pCAMBIA1301질립구건공정균개도,이건립대화혜란유전전화체계,병비교불동수체처리방식、균액농도화침염방식등대대화혜란전화적영향.결과표명:(1)이절성3 mm좌우적PLBs소괴작위수체재료,용OD600치위0.6적LBA4404근암농간균균주,병용MS+1.0 mg/L BA+200 μmol/L AS(을선정향동)적액체배양기장균액등체적희석침염,전화솔가체62.5%.(2)대화혜란대조매소(Hyg)십분민감,5 mg/L Hyg대전화후적PLBs유교호적사선효과,사선후최고성활솔위13.0%.(3)PCR검측초보증명,통과근암농간균개도적방법획득료2주전기인대화혜란식주.
