生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2011年
2期
238-242
,共5页
汪琳%罗英%周琦%赖平安%张向东%柏亚铎
汪琳%囉英%週琦%賴平安%張嚮東%柏亞鐸
왕림%라영%주기%뢰평안%장향동%백아탁
核酸试纸条%环介导等温扩增%转EPSPS基因作物%检测
覈痠試紙條%環介導等溫擴增%轉EPSPS基因作物%檢測
핵산시지조%배개도등온확증%전EPSPS기인작물%검측
目的:建立快速、简便和特异的检测转EPSPS基因作物的方法.方法:针对转EPSPS基因作物外源基因cp4-EPSPS的8个区域,设计2对特异性引物和1对环引物,对反应体系中的MgSO4、内引物、环引物、甜菜碱、dNTP浓度和反应温度等条件分别进行优化,并用核酸试纸条对扩增产物进行检测,建立用于检测转EPSPS基因作物的环介导等温扩增方法(LAMP).结果:用建立的LAMP方法检测转EPSPS基因作物时,在64℃恒温反应30 min,即可根据试纸条显色直接观察结果;该方法具有高度特异性,可检测到10个拷贝的EPSPS DNA.结论:LAMP方法可快速、灵敏、特异、经济地检测转EPSPS基因作物,在基层和实验室都具有良好的应用前景.
目的:建立快速、簡便和特異的檢測轉EPSPS基因作物的方法.方法:針對轉EPSPS基因作物外源基因cp4-EPSPS的8箇區域,設計2對特異性引物和1對環引物,對反應體繫中的MgSO4、內引物、環引物、甜菜堿、dNTP濃度和反應溫度等條件分彆進行優化,併用覈痠試紙條對擴增產物進行檢測,建立用于檢測轉EPSPS基因作物的環介導等溫擴增方法(LAMP).結果:用建立的LAMP方法檢測轉EPSPS基因作物時,在64℃恆溫反應30 min,即可根據試紙條顯色直接觀察結果;該方法具有高度特異性,可檢測到10箇拷貝的EPSPS DNA.結論:LAMP方法可快速、靈敏、特異、經濟地檢測轉EPSPS基因作物,在基層和實驗室都具有良好的應用前景.
목적:건립쾌속、간편화특이적검측전EPSPS기인작물적방법.방법:침대전EPSPS기인작물외원기인cp4-EPSPS적8개구역,설계2대특이성인물화1대배인물,대반응체계중적MgSO4、내인물、배인물、첨채감、dNTP농도화반응온도등조건분별진행우화,병용핵산시지조대확증산물진행검측,건립용우검측전EPSPS기인작물적배개도등온확증방법(LAMP).결과:용건립적LAMP방법검측전EPSPS기인작물시,재64℃항온반응30 min,즉가근거시지조현색직접관찰결과;해방법구유고도특이성,가검측도10개고패적EPSPS DNA.결론:LAMP방법가쾌속、령민、특이、경제지검측전EPSPS기인작물,재기층화실험실도구유량호적응용전경.
