生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
1期
74-78
,共5页
姜娜娜%赵传志%赵光敬%李长生%夏晗%王兴军
薑娜娜%趙傳誌%趙光敬%李長生%夏晗%王興軍
강나나%조전지%조광경%리장생%하함%왕흥군
番茄%多聚半乳糖醛酸酶%果实特异启动子%遗传转化体系
番茄%多聚半乳糖醛痠酶%果實特異啟動子%遺傳轉化體繫
번가%다취반유당철산매%과실특이계동자%유전전화체계
为了实现外源基因在番茄果实中的高效和特异表达,克隆了番茄果实特异基因多聚半乳糖醛酸酶基因( Polygalacturonase,PG)的启动子.以中蔬四号番茄为材料,建立并优化了以子叶为外植体的番茄高效再生和遗传转化体系；以GUS为报告基因,构建PG:GUS植物表达载体,转化番茄.结果表明,在1.0 mg/L ZT的MS分化培养中,番茄子叶的发芽率最高,芽的诱导率高达91％,且发生畸态芽和褐化的外植体最少；通过抗生素浓度对农杆菌的抑制效果试验发现,当头孢霉素的浓度为200 mg/L时,抑制农杆菌的效果最好；成功克隆了番茄PG启动子,将PG启动子驱动的GUS基因转入番茄,对转基因后代果实的GUS染色表明,PG启动子驱动的外源基因在果实中特异表达.
為瞭實現外源基因在番茄果實中的高效和特異錶達,剋隆瞭番茄果實特異基因多聚半乳糖醛痠酶基因( Polygalacturonase,PG)的啟動子.以中蔬四號番茄為材料,建立併優化瞭以子葉為外植體的番茄高效再生和遺傳轉化體繫；以GUS為報告基因,構建PG:GUS植物錶達載體,轉化番茄.結果錶明,在1.0 mg/L ZT的MS分化培養中,番茄子葉的髮芽率最高,芽的誘導率高達91％,且髮生畸態芽和褐化的外植體最少；通過抗生素濃度對農桿菌的抑製效果試驗髮現,噹頭孢黴素的濃度為200 mg/L時,抑製農桿菌的效果最好；成功剋隆瞭番茄PG啟動子,將PG啟動子驅動的GUS基因轉入番茄,對轉基因後代果實的GUS染色錶明,PG啟動子驅動的外源基因在果實中特異錶達.
위료실현외원기인재번가과실중적고효화특이표체,극륭료번가과실특이기인다취반유당철산매기인( Polygalacturonase,PG)적계동자.이중소사호번가위재료,건립병우화료이자협위외식체적번가고효재생화유전전화체계；이GUS위보고기인,구건PG:GUS식물표체재체,전화번가.결과표명,재1.0 mg/L ZT적MS분화배양중,번가자협적발아솔최고,아적유도솔고체91％,차발생기태아화갈화적외식체최소；통과항생소농도대농간균적억제효과시험발현,당두포매소적농도위200 mg/L시,억제농간균적효과최호；성공극륭료번가PG계동자,장PG계동자구동적GUS기인전입번가,대전기인후대과실적GUS염색표명,PG계동자구동적외원기인재과실중특이표체.
