CAJ | 학술논문

目的研究中枢神经系统小胶质细胞(MG)正常发育尤其是少突胶质细胞前体细胞(OPCs) 最易受损阶段的发育,探讨宫内感染早产鼠MG依赖的OPCs损伤机制.方法 ①观察正常C57B/L鼠不同胎龄(孕10、15 d )和生后(0、5、10 d)MG和OPCs在脑白质的发育分布情况,明确两者在发育和分布上的关联.②建立脂多糖(LPS)宫内感染新生鼠模型(宫内分别接种LPS 5、10和20 μg·mL-1为感染A～C组),以PBS溶液接种为对照组.以Tomato lectin作为静息状态MG标志,CD68作为活化MG的特殊抗体,O4+作为OPCs抗体,抗体浮片法进行免疫组化染色并计数分析.③ Western blot法检测各组脑室周围白质组织Toll样受体-4 (TLR-4)蛋白表达.④采用ELISA法检测各组MG活化后IL-2、TNF-α和SOD水平变化.结果 ①MG在孕10 d胎鼠Tomato lectin表达低下,孕15 d胎鼠表达显著增高,MG主要分布在脑室周围白质区域,灰质皮质几乎不表达.出生后,脑室周围白质区域MG的表达有所下降,灰质皮质的表达逐渐增高.②感染A~C组CD68+细胞数量均显著增加,与对照组差异有统计学意义(P<0.01),但感染C组与B组CD68+细胞数量差异无统计学意义(P>0.05).与对照组比较,感染A~C组均可见O4+细胞数量显著性下降(P<0.01),其中以感染C组下降最为明显.③对照组未检测到TLR-4蛋白表达,感染A~C组均可见LPS剂量依赖的TLR-4蛋白表达增加,与对照组差异有统计学意义(P<0.05).④随接种LPS剂量增大,IL-2和TNF-α水平较对照组呈显著增加趋势,SOD水平较对照组呈显著降低趋势.结论新生鼠发育依赖的MG在脑白质受损区域过度表达,表明活化MG起到本底激活效应,是早产儿脑白质损伤的物质基础.
목적 연구중추신경계통소효질세포(MG)정상발육우기시소돌효질세포전체세포(OPCs) 최역수손계단적발육,탐토궁내감염조산서MG의뢰적OPCs손상궤제.방법 ①관찰정상C57B/L서불동태령(잉10、15 d )화생후(0、5、10 d)MG화OPCs재뇌백질적발육분포정황,명학량자재발육화분포상적관련.②건립지다당(LPS)궁내감염신생서모형(궁내분별접충LPS 5、10화20 μg·mL-1위감염A～C조),이PBS용액접충위대조조.이Tomato lectin작위정식상태MG표지,CD68작위활화MG적특수항체,O4+작위OPCs항체,항체부편법진행면역조화염색병계수분석.③ Western blot법검측각조뇌실주위백질조직Toll양수체-4 (TLR-4)단백표체.④채용ELISA법검측각조MG활화후IL-2、TNF-α화SOD수평변화.결과 ①MG재잉10 d태서Tomato lectin표체저하,잉15 d태서표체현저증고,MG주요분포재뇌실주위백질구역,회질피질궤호불표체.출생후,뇌실주위백질구역MG적표체유소하강,회질피질적표체축점증고.②감염A~C조CD68+세포수량균현저증가,여대조조차이유통계학의의(P<0.01),단감염C조여B조CD68+세포수량차이무통계학의의(P>0.05).여대조조비교,감염A~C조균가견O4+세포수량현저성하강(P<0.01),기중이감염C조하강최위명현.③대조조미검측도TLR-4단백표체,감염A~C조균가견LPS제량의뢰적TLR-4단백표체증가,여대조조차이유통계학의의(P<0.05).④수접충LPS제량증대,IL-2화TNF-α수평교대조조정현저증가추세,SOD수평교대조조정현저강저추세.결론 신생서발육의뢰적MG재뇌백질수손구역과도표체,표명활화MG기도본저격활효응,시조산인뇌백질손상적물질기출.