生物加工过程
生物加工過程
생물가공과정
CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING
2012年
2期
34-39
,共6页
何国斌%蔡少丽%柯崇榕%黄平%张明亮%黄建忠
何國斌%蔡少麗%柯崇榕%黃平%張明亮%黃建忠
하국빈%채소려%가숭용%황평%장명량%황건충
漆酶%灵芝%分离纯化%酶学性质
漆酶%靈芝%分離純化%酶學性質
칠매%령지%분리순화%매학성질
采用冻干浓缩、(NH4)2SO4盐析、Hi Trap phenyl( FF)疏水层析和Q Sepharose Fast Flow离子交换层析对灵芝EIM-40发酵液进行分离纯化,获得纯化漆酶,纯化倍数为14.6,回收率为5.3％.SDS - PAGE银染的结果为单一条带,相对分子质量约为6.53×104.以愈创木酚和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为催化底物进行酶学性质研究,最适pH分别为4.8和4.5,最适温度分别为55和50℃,2种底物在pH4.0～5.0范围内,温度低于50℃时,酶的稳定性都很好.以愈创木酚为底物,Km=645.0 μmol/L;以ABTS为底物,Km=22.2μmol/L.Cu2对该酶起激活作用,Fe2+、Ca2+、Ba2+则完全抑制酶的活性.
採用凍榦濃縮、(NH4)2SO4鹽析、Hi Trap phenyl( FF)疏水層析和Q Sepharose Fast Flow離子交換層析對靈芝EIM-40髮酵液進行分離純化,穫得純化漆酶,純化倍數為14.6,迴收率為5.3％.SDS - PAGE銀染的結果為單一條帶,相對分子質量約為6.53×104.以愈創木酚和2,2-聯氮-二(3-乙基-苯併噻唑-6-磺痠)二銨鹽(ABTS)為催化底物進行酶學性質研究,最適pH分彆為4.8和4.5,最適溫度分彆為55和50℃,2種底物在pH4.0～5.0範圍內,溫度低于50℃時,酶的穩定性都很好.以愈創木酚為底物,Km=645.0 μmol/L;以ABTS為底物,Km=22.2μmol/L.Cu2對該酶起激活作用,Fe2+、Ca2+、Ba2+則完全抑製酶的活性.
채용동간농축、(NH4)2SO4염석、Hi Trap phenyl( FF)소수층석화Q Sepharose Fast Flow리자교환층석대령지EIM-40발효액진행분리순화,획득순화칠매,순화배수위14.6,회수솔위5.3％.SDS - PAGE은염적결과위단일조대,상대분자질량약위6.53×104.이유창목분화2,2-련담-이(3-을기-분병새서-6-광산)이안염(ABTS)위최화저물진행매학성질연구,최괄pH분별위4.8화4.5,최괄온도분별위55화50℃,2충저물재pH4.0～5.0범위내,온도저우50℃시,매적은정성도흔호.이유창목분위저물,Km=645.0 μmol/L;이ABTS위저물,Km=22.2μmol/L.Cu2대해매기격활작용,Fe2+、Ca2+、Ba2+칙완전억제매적활성.
