CAJ | 학술논문

利用PCR技术从实验室建立的天山雪莲DNA文库中克隆了天山雪莲质膜水孔蛋白基因sikPIP3,构建了植物表达载体pBI121-sikPIP3,通过农杆菌介导法转化烟草品种NC89,经PCR和RT-PCR检测证明目的基因成功导入并得到了表达,采用水分胁迫进行抗旱分析和采用冷冻胁迫进行抗寒性分析.结果显示:(1)克隆出具有水孔蛋白基因特性的sikPIP3基因.(2)经断水干旱处理,转基因烟草的生长表型优于野生型烟草,特别是在断水9d的情况下,野生型烟草已经完全萎蔫,转基因烟草萎蔫症状较轻；生理指标测量结果显示,转基因烟草的相对电导率和MDA的含量低于野生型烟草,相对含水量和CAT活性高于野生型烟草.试验表明转sikPIP3烟草的抗旱性高于野生型烟草.(3)经不同温度胁迫处理,转基因烟草的生长表型优于野生型烟草,特别是在-4℃冷处理6h情况下,野生型烟草已经完全萎蔫,转基因烟草只出现少量伤斑；生理指标分析结果表明,转基因烟草的相对电导率和MDA的含量低于野生型烟草,CAT活性高于野生型烟草.试验表明转sikPIP3烟草的抗寒性高于野生型烟草.综合结果表明:sikPIP3基因在抗逆基因工程方面具有较高的应用前景.
이용PCR기술종실험실건립적천산설련DNA문고중극륭료천산설련질막수공단백기인sikPIP3,구건료식물표체재체pBI121-sikPIP3,통과농간균개도법전화연초품충NC89,경PCR화RT-PCR검측증명목적기인성공도입병득도료표체,채용수분협박진행항한분석화채용냉동협박진행항한성분석.결과현시:(1)극륭출구유수공단백기인특성적sikPIP3기인.(2)경단수간한처리,전기인연초적생장표형우우야생형연초,특별시재단수9d적정황하,야생형연초이경완전위언,전기인연초위언증상교경；생리지표측량결과현시,전기인연초적상대전도솔화MDA적함량저우야생형연초,상대함수량화CAT활성고우야생형연초.시험표명전sikPIP3연초적항한성고우야생형연초.(3)경불동온도협박처리,전기인연초적생장표형우우야생형연초,특별시재-4℃랭처리6h정황하,야생형연초이경완전위언,전기인연초지출현소량상반；생리지표분석결과표명,전기인연초적상대전도솔화MDA적함량저우야생형연초,CAT활성고우야생형연초.시험표명전sikPIP3연초적항한성고우야생형연초.종합결과표명:sikPIP3기인재항역기인공정방면구유교고적응용전경.