CAJ | 학술논문

通过DEAE-纤维素52离子交换层析、Sephadex G-200凝胶层析,从海刺猬体腔液中分离纯化海刺猬Glyptocidaris crenularis凝集素(简称为GCL),并对其部分性质和色氨酸的化学修饰进行了研究.结果表明:在还原与非还原SDS - PAGE上,GCL都显示单一蛋白质条带,其相对分子量为94462; GCL对人O型、兔、鸡、狗红细胞均具有血凝活性,对兔和狗红细胞的血凝活性最强,但对人A、B、AB型及鲫红细胞无血凝活性；GCL血凝活性在温度为4～33℃时最高,经36℃热处理10 min后,GCL对兔红细胞的血凝活性保留25％,经48℃加热10 min后,其血凝活性完全丧失；GCL血凝活性在pH为7.5 ～8.5时最高；ca2+对GCL血凝活性无抑制作用,EDTA和Mg2+对其血凝活性有抑制作用；GCL血凝活性不被所测试的α-乳糖、D-果糖、D-半乳糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和γ-球蛋白所抑制,但被蔗糖和麦芽糖所抑制,最小抑制浓度分别为40 mmol/L和20 mmol/L;用N-溴代丁二酰亚胺(NBS)对GCL分子中的色氨酸(Trp)残基进行化学修饰,有5.1个Trp残基被修饰,修饰后其血凝活性丧失75％,表明Trp残基是GCL血凝活性的重要组成部分.
통과DEAE-섬유소52리자교환층석、Sephadex G-200응효층석,종해자위체강액중분리순화해자위Glyptocidaris crenularis응집소(간칭위GCL),병대기부분성질화색안산적화학수식진행료연구.결과표명:재환원여비환원SDS - PAGE상,GCL도현시단일단백질조대,기상대분자량위94462; GCL대인O형、토、계、구홍세포균구유혈응활성,대토화구홍세포적혈응활성최강,단대인A、B、AB형급즉홍세포무혈응활성；GCL혈응활성재온도위4～33℃시최고,경36℃열처리10 min후,GCL대토홍세포적혈응활성보류25％,경48℃가열10 min후,기혈응활성완전상실；GCL혈응활성재pH위7.5 ～8.5시최고；ca2+대GCL혈응활성무억제작용,EDTA화Mg2+대기혈응활성유억제작용；GCL혈응활성불피소측시적α-유당、D-과당、D-반유당、D-감로당、D-포도당화γ-구단백소억제,단피자당화맥아당소억제,최소억제농도분별위40 mmol/L화20 mmol/L;용N-추대정이선아알(NBS)대GCL분자중적색안산(Trp)잔기진행화학수식,유5.1개Trp잔기피수식,수식후기혈응활성상실75％,표명Trp잔기시GCL혈응활성적중요조성부분.