创伤外科杂志
創傷外科雜誌
창상외과잡지
JOURNAL OF AUMATIC SURGERY
2005年
4期
291-293
,共3页
李海红%付小兵%周岗%白晓东%陈伟%朱国俊%蔡存良%孙同柱
李海紅%付小兵%週崗%白曉東%陳偉%硃國俊%蔡存良%孫同柱
리해홍%부소병%주강%백효동%진위%주국준%채존량%손동주
人骨髓间充质干细胞%分离培养%鉴定%标记%细胞周期
人骨髓間充質榦細胞%分離培養%鑒定%標記%細胞週期
인골수간충질간세포%분리배양%감정%표기%세포주기
目的探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)体外分离培养、鉴定和标记的方法以及生物学特性.方法无菌条件下穿刺人髂后上嵴抽取骨髓,采用直接贴壁法分离纯化hMSCs,体外扩增,用免疫细胞化学法及流式细胞仪分别对培养的hMSCs进行鉴定,同时检测第3代和同代溴脱氧尿嘧啶(5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)标记的hMSCs细胞周期.结果体外培养的原代hMSCs在培养24小时内可见少量贴壁细胞,7天达到融合,免疫细胞化学示CD44和CD105表达阳性,CD34表达阴性,流式细胞仪示CD44阳性率为89.64%,CD34为0.11%.大部分hMSCs核抗BrdU染色阳性,阳性率达90%.细胞周期显示第3代和同代BrdU标记的hMSCs约有90%的细胞处于G0/G1期,第10代为80%.结论 hMSCs在体外很容易分离培养和扩增,但随着传代次数的增加,hMSCs变得宽大扁平且增殖速度减慢,出现衰老现象;用BrdU标记hMSCs对其细胞周期无明显影响,可作为标记细胞的一种有效手段.
目的探討人骨髓間充質榦細胞(hMSCs)體外分離培養、鑒定和標記的方法以及生物學特性.方法無菌條件下穿刺人髂後上嵴抽取骨髓,採用直接貼壁法分離純化hMSCs,體外擴增,用免疫細胞化學法及流式細胞儀分彆對培養的hMSCs進行鑒定,同時檢測第3代和同代溴脫氧尿嘧啶(5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)標記的hMSCs細胞週期.結果體外培養的原代hMSCs在培養24小時內可見少量貼壁細胞,7天達到融閤,免疫細胞化學示CD44和CD105錶達暘性,CD34錶達陰性,流式細胞儀示CD44暘性率為89.64%,CD34為0.11%.大部分hMSCs覈抗BrdU染色暘性,暘性率達90%.細胞週期顯示第3代和同代BrdU標記的hMSCs約有90%的細胞處于G0/G1期,第10代為80%.結論 hMSCs在體外很容易分離培養和擴增,但隨著傳代次數的增加,hMSCs變得寬大扁平且增殖速度減慢,齣現衰老現象;用BrdU標記hMSCs對其細胞週期無明顯影響,可作為標記細胞的一種有效手段.
목적탐토인골수간충질간세포(hMSCs)체외분리배양、감정화표기적방법이급생물학특성.방법무균조건하천자인가후상척추취골수,채용직접첩벽법분리순화hMSCs,체외확증,용면역세포화학법급류식세포의분별대배양적hMSCs진행감정,동시검측제3대화동대추탈양뇨밀정(5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)표기적hMSCs세포주기.결과체외배양적원대hMSCs재배양24소시내가견소량첩벽세포,7천체도융합,면역세포화학시CD44화CD105표체양성,CD34표체음성,류식세포의시CD44양성솔위89.64%,CD34위0.11%.대부분hMSCs핵항BrdU염색양성,양성솔체90%.세포주기현시제3대화동대BrdU표기적hMSCs약유90%적세포처우G0/G1기,제10대위80%.결론 hMSCs재체외흔용역분리배양화확증,단수착전대차수적증가,hMSCs변득관대편평차증식속도감만,출현쇠로현상;용BrdU표기hMSCs대기세포주기무명현영향,가작위표기세포적일충유효수단.
