中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2005年
9期
84-88
,共5页
张春玉%黄国辉%林景卫%孙非%许守民%刘立侠
張春玉%黃國輝%林景衛%孫非%許守民%劉立俠
장춘옥%황국휘%림경위%손비%허수민%류립협
树舌%凝集素%生化特性%血凝集活性
樹舌%凝集素%生化特性%血凝集活性
수설%응집소%생화특성%혈응집활성
用硫酸铵分级沉淀、离子交换和HPLC层析等方法,从长白山药用真菌树舌的菌丝体中分离纯化了一种凝集素(Ganoderma applanatum lectin,简称GAL),SDS-PAGE检测其为单一蛋白条带.经过SDS-PAGE测得其亚基分子量为15kDa左右,HPLC分析分子量为58kDa左右,表明GAL由4个亚基组成.氨基酸组成分析表明,GAL中甘氨酸含量较高,不合蛋氨酸和色氨酸,中性糖含量约11.2%.圆二色CD谱显示其含有3.6%的α螺旋、46.8%的β转角和49.6%无规则卷曲,不合有β折叠.GAL可以凝集供试的2种动物血和3种血型人血的血红细胞,但对不同来源的血红细胞凝集滴度不同.糖抑制实验表明,只有棉籽糖和D-松三糖部分抑制GAL的凝血活性.GAL具有较好的热稳定性且其凝血活性不受Ca2+、Mg2+和Zn2+等二价阳离子的影响.
用硫痠銨分級沉澱、離子交換和HPLC層析等方法,從長白山藥用真菌樹舌的菌絲體中分離純化瞭一種凝集素(Ganoderma applanatum lectin,簡稱GAL),SDS-PAGE檢測其為單一蛋白條帶.經過SDS-PAGE測得其亞基分子量為15kDa左右,HPLC分析分子量為58kDa左右,錶明GAL由4箇亞基組成.氨基痠組成分析錶明,GAL中甘氨痠含量較高,不閤蛋氨痠和色氨痠,中性糖含量約11.2%.圓二色CD譜顯示其含有3.6%的α螺鏇、46.8%的β轉角和49.6%無規則捲麯,不閤有β摺疊.GAL可以凝集供試的2種動物血和3種血型人血的血紅細胞,但對不同來源的血紅細胞凝集滴度不同.糖抑製實驗錶明,隻有棉籽糖和D-鬆三糖部分抑製GAL的凝血活性.GAL具有較好的熱穩定性且其凝血活性不受Ca2+、Mg2+和Zn2+等二價暘離子的影響.
용류산안분급침정、리자교환화HPLC층석등방법,종장백산약용진균수설적균사체중분리순화료일충응집소(Ganoderma applanatum lectin,간칭GAL),SDS-PAGE검측기위단일단백조대.경과SDS-PAGE측득기아기분자량위15kDa좌우,HPLC분석분자량위58kDa좌우,표명GAL유4개아기조성.안기산조성분석표명,GAL중감안산함량교고,불합단안산화색안산,중성당함량약11.2%.원이색CD보현시기함유3.6%적α라선、46.8%적β전각화49.6%무규칙권곡,불합유β절첩.GAL가이응집공시적2충동물혈화3충혈형인혈적혈홍세포,단대불동래원적혈홍세포응집적도불동.당억제실험표명,지유면자당화D-송삼당부분억제GAL적응혈활성.GAL구유교호적열은정성차기응혈활성불수Ca2+、Mg2+화Zn2+등이개양리자적영향.
