武汉植物学研究
武漢植物學研究
무한식물학연구
JOURNAL OF WUHAN BOTANICAL RESEARCH
2008年
3期
251-254
,共4页
李雄英%罗育%吴耀生%蒋军富%赵瑞强%蓝秀万
李雄英%囉育%吳耀生%蔣軍富%趙瑞彊%藍秀萬
리웅영%라육%오요생%장군부%조서강%람수만
绞股蓝%基因组DNA%RAPD%鉴别
絞股藍%基因組DNA%RAPD%鑒彆
교고람%기인조DNA%RAPD%감별
运用RAPD技术对绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)及其伪品进行DNA指纹图谱的鉴别研究.采用改进的CTAB法提取七叶绞股蓝、五叶绞股蓝、乌蔹莓(Cayratia japonica)3种植物的总DNA,主要以七叶绞股蓝DNA为模板,采用随机引物WGS001进行PCR扩增,对反应体系包括模板、Mg2+、Taq酶、牛血清白蛋白(BSA)、退火温度进行优化.优化的反应体系总体积25 μL ,含MgCl2 2 mmol/L、dNTP 0.2 mmol/L、引物 0.4 μmol/L、模板60 ng、Taq 酶1 U、BSA 2 μg/μL,退火温度58℃.用10条含20个碱基的随机引物对以上3种植物总DNA作PCR扩增,进行引物筛选.筛选得到的两条随机引物(WGS001、WGS004)可扩增得到识别这些物种基因组DNA的多态性片段.这些片段可以有效地鉴别绞股蓝和乌蔹莓.
運用RAPD技術對絞股藍(Gynostemma pentaphyllum)及其偽品進行DNA指紋圖譜的鑒彆研究.採用改進的CTAB法提取七葉絞股藍、五葉絞股藍、烏蘞莓(Cayratia japonica)3種植物的總DNA,主要以七葉絞股藍DNA為模闆,採用隨機引物WGS001進行PCR擴增,對反應體繫包括模闆、Mg2+、Taq酶、牛血清白蛋白(BSA)、退火溫度進行優化.優化的反應體繫總體積25 μL ,含MgCl2 2 mmol/L、dNTP 0.2 mmol/L、引物 0.4 μmol/L、模闆60 ng、Taq 酶1 U、BSA 2 μg/μL,退火溫度58℃.用10條含20箇堿基的隨機引物對以上3種植物總DNA作PCR擴增,進行引物篩選.篩選得到的兩條隨機引物(WGS001、WGS004)可擴增得到識彆這些物種基因組DNA的多態性片段.這些片段可以有效地鑒彆絞股藍和烏蘞莓.
운용RAPD기술대교고람(Gynostemma pentaphyllum)급기위품진행DNA지문도보적감별연구.채용개진적CTAB법제취칠협교고람、오협교고람、오렴매(Cayratia japonica)3충식물적총DNA,주요이칠협교고람DNA위모판,채용수궤인물WGS001진행PCR확증,대반응체계포괄모판、Mg2+、Taq매、우혈청백단백(BSA)、퇴화온도진행우화.우화적반응체계총체적25 μL ,함MgCl2 2 mmol/L、dNTP 0.2 mmol/L、인물 0.4 μmol/L、모판60 ng、Taq 매1 U、BSA 2 μg/μL,퇴화온도58℃.용10조함20개감기적수궤인물대이상3충식물총DNA작PCR확증,진행인물사선.사선득도적량조수궤인물(WGS001、WGS004)가확증득도식별저사물충기인조DNA적다태성편단.저사편단가이유효지감별교고람화오렴매.