癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2009年
2期
119-122
,共4页
吴智群%李庆霞%李臻%于翠娟%罗亚宁%胡静%王红
吳智群%李慶霞%李臻%于翠娟%囉亞寧%鬍靜%王紅
오지군%리경하%리진%우취연%라아저%호정%왕홍
肝癌%发病机制%p53基因%突变
肝癌%髮病機製%p53基因%突變
간암%발병궤제%p53기인%돌변
背景与目的:研究p53基因249编码子突变对p53基因功能的影响.材料与方法:利用基因打靶技术在小鼠胚胎干细胞(KS)p53基因249编码子中引入点突变,使编码子249由精氨酸(Arg)变成丝氨酸(Ser),然后将含突变的Es细胞显微注射到Hpn-/-小鼠囊胚中,将注射过的囊胚植入假孕的雌性小鼠子宫,到第14 d取小鼠胚胎纤维母细胞(EF),用含HAT的培养液筛选出从ES细胞分化而成的鼠EF细胞,经测序证实细胞含有由249 Arg到Ser的突变.用不同剂量的电离辐射(IR)或紫外光(UV)分别照射ES或EF细胞,然后利用流式细胞仪检测该突变对小鼠ES细胞周期及对ES和EF细胞凋亡的影响,并利用Western blot检测相关蛋白的表达.结果:用IR处理ES细胞后,含p53基因249编码子突变的Es细胞对IR诱导的G1Go细胞周期阻滞作用减弱(P<0.05).用IR或UV处理ES和EF细胞后,含p53基因249编码子突变的ES及EF细胞凋亡百分数较含野生型p53者明显减少(P<0.05).含p53基因249编码子突变的ES及EF细胞p53的表达与含野生型p53者差别不明显(P>0.05);但其bax和p21的表达,较含野生型p53的细胞表达减少(P<0.05).结论:p53基因249编码子突变可减弱p53在细胞周期阻滞和凋亡中的作用,但对p53的表达无明显影响.
揹景與目的:研究p53基因249編碼子突變對p53基因功能的影響.材料與方法:利用基因打靶技術在小鼠胚胎榦細胞(KS)p53基因249編碼子中引入點突變,使編碼子249由精氨痠(Arg)變成絲氨痠(Ser),然後將含突變的Es細胞顯微註射到Hpn-/-小鼠囊胚中,將註射過的囊胚植入假孕的雌性小鼠子宮,到第14 d取小鼠胚胎纖維母細胞(EF),用含HAT的培養液篩選齣從ES細胞分化而成的鼠EF細胞,經測序證實細胞含有由249 Arg到Ser的突變.用不同劑量的電離輻射(IR)或紫外光(UV)分彆照射ES或EF細胞,然後利用流式細胞儀檢測該突變對小鼠ES細胞週期及對ES和EF細胞凋亡的影響,併利用Western blot檢測相關蛋白的錶達.結果:用IR處理ES細胞後,含p53基因249編碼子突變的Es細胞對IR誘導的G1Go細胞週期阻滯作用減弱(P<0.05).用IR或UV處理ES和EF細胞後,含p53基因249編碼子突變的ES及EF細胞凋亡百分數較含野生型p53者明顯減少(P<0.05).含p53基因249編碼子突變的ES及EF細胞p53的錶達與含野生型p53者差彆不明顯(P>0.05);但其bax和p21的錶達,較含野生型p53的細胞錶達減少(P<0.05).結論:p53基因249編碼子突變可減弱p53在細胞週期阻滯和凋亡中的作用,但對p53的錶達無明顯影響.
배경여목적:연구p53기인249편마자돌변대p53기인공능적영향.재료여방법:이용기인타파기술재소서배태간세포(KS)p53기인249편마자중인입점돌변,사편마자249유정안산(Arg)변성사안산(Ser),연후장함돌변적Es세포현미주사도Hpn-/-소서낭배중,장주사과적낭배식입가잉적자성소서자궁,도제14 d취소서배태섬유모세포(EF),용함HAT적배양액사선출종ES세포분화이성적서EF세포,경측서증실세포함유유249 Arg도Ser적돌변.용불동제량적전리복사(IR)혹자외광(UV)분별조사ES혹EF세포,연후이용류식세포의검측해돌변대소서ES세포주기급대ES화EF세포조망적영향,병이용Western blot검측상관단백적표체.결과:용IR처리ES세포후,함p53기인249편마자돌변적Es세포대IR유도적G1Go세포주기조체작용감약(P<0.05).용IR혹UV처리ES화EF세포후,함p53기인249편마자돌변적ES급EF세포조망백분수교함야생형p53자명현감소(P<0.05).함p53기인249편마자돌변적ES급EF세포p53적표체여함야생형p53자차별불명현(P>0.05);단기bax화p21적표체,교함야생형p53적세포표체감소(P<0.05).결론:p53기인249편마자돌변가감약p53재세포주기조체화조망중적작용,단대p53적표체무명현영향.
