CAJ | 학술논문

目的探讨大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)在体外由碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、全反式维甲酸(RA)联合诱导下分化成的神经细胞样细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的可行性.方法采用出生4周SD大鼠的全骨髓细胞进行培养,利用bFGF+EGF+RA在体外诱导BMSCs向神经细胞样细胞分化.在倒置相差显微镜下每日观察、记录BMSCs的诱导分化情况,并应用免疫组化技术对细胞进行兔抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)单克隆抗体鉴定.实验动物分为3组:细胞移植组(A组)、模型对照组(B组)、正常对照组(C组).A、B组采用改良Allens法建立大鼠急性脊髓损伤模型.A组在造模后立即将诱导后的BMSCs悬液多点缓慢注入到损伤节段的头侧和尾侧,B组同法注射等量磷酸盐缓冲液.C组不造模,于相同部位注射等量磷酸盐缓冲液.于伤后1～5周,按照BBB法观察脊髓神经功能恢复情况并处死动物取材,用HE染色观察脊髓病理变化.结果诱导7 d后有部分细胞具备神经元样细胞形态,胞体呈锥形或圆形,有较长单极或多极的突起,有NSE阳性细胞表达;细胞移植后1～5周,A、B组动物运动功能均有不同程度恢复,但B组恢复较慢,BBB评分差异有统计学意义(P<0.05);组织形态学观察示A组损伤脊髓恢复较好.结论 bFGF、EGF和RA可以联合诱导BMSCs向神经干细胞分化,并可调控神经元分化,将其移植于大鼠脊髓损伤区,可促进脊髓损伤的恢复.
목적 탐토대서골수기질세포(BMSCs)재체외유감성성섬유세포생장인자(bFGF)、표피생장인자(EGF)、전반식유갑산(RA)연합유도하분화성적신경세포양세포이식치료대서척수손상적가행성.방법 채용출생4주SD대서적전골수세포진행배양,이용bFGF+EGF+RA재체외유도BMSCs향신경세포양세포분화.재도치상차현미경하매일관찰、기록BMSCs적유도분화정황,병응용면역조화기술대세포진행토항신경원특이성희순화매(NSE)단극륭항체감정.실험동물분위3조:세포이식조(A조)、모형대조조(B조)、정상대조조(C조).A、B조채용개량Allens법건립대서급성척수손상모형.A조재조모후립즉장유도후적BMSCs현액다점완만주입도손상절단적두측화미측,B조동법주사등량린산염완충액.C조불조모,우상동부위주사등량린산염완충액.우상후1～5주,안조BBB법관찰척수신경공능회복정황병처사동물취재,용HE염색관찰척수병리변화.결과 유도7 d후유부분세포구비신경원양세포형태,포체정추형혹원형,유교장단겁혹다겁적돌기,유NSE양성세포표체;세포이식후1～5주,A、B조동물운동공능균유불동정도회복,단B조회복교만,BBB평분차이유통계학의의(P<0.05);조직형태학관찰시A조손상척수회복교호.결론 bFGF、EGF화RA가이연합유도BMSCs향신경간세포분화,병가조공신경원분화,장기이식우대서척수손상구,가촉진척수손상적회복.