中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2010年
1期
40-43
,共4页
林光美%随粉粉%林楠%郑翔宇%侯长红
林光美%隨粉粉%林楠%鄭翔宇%侯長紅
림광미%수분분%림남%정상우%후장홍
雷公藤%RAPD%DNA%反应体系
雷公籐%RAPD%DNA%反應體繫
뢰공등%RAPD%DNA%반응체계
筛选并建立雷公藤叶片基因组DNA的Random Amplified Polymorphic DNA技术最优反应体系.采用改良的CTAB法提取叶片总DNA,然后通过对RAPD反应体系中最主要的退火温度、引物浓度、dNTP浓度、DNA模板浓度以及Tag DNA聚合酶浓度等5个因子逐个进行单因子优化.结果显示20μl PCR反应体系中,雷公藤叶片基因组DNA RAPD最优反应体系为,最佳温度36℃,引物浓度为1.1 μmol/L,dNTP浓度1.25 mmol/L,DNA模板浓度3790 ng/L,Tag DNA聚合酶用量为5.625 U/L.通过构建该雷公藤叶片基因组的RAPD优化体系,为接下去进一步的多样性分析、遗传图谱构建提供基础.
篩選併建立雷公籐葉片基因組DNA的Random Amplified Polymorphic DNA技術最優反應體繫.採用改良的CTAB法提取葉片總DNA,然後通過對RAPD反應體繫中最主要的退火溫度、引物濃度、dNTP濃度、DNA模闆濃度以及Tag DNA聚閤酶濃度等5箇因子逐箇進行單因子優化.結果顯示20μl PCR反應體繫中,雷公籐葉片基因組DNA RAPD最優反應體繫為,最佳溫度36℃,引物濃度為1.1 μmol/L,dNTP濃度1.25 mmol/L,DNA模闆濃度3790 ng/L,Tag DNA聚閤酶用量為5.625 U/L.通過構建該雷公籐葉片基因組的RAPD優化體繫,為接下去進一步的多樣性分析、遺傳圖譜構建提供基礎.
사선병건립뢰공등협편기인조DNA적Random Amplified Polymorphic DNA기술최우반응체계.채용개량적CTAB법제취협편총DNA,연후통과대RAPD반응체계중최주요적퇴화온도、인물농도、dNTP농도、DNA모판농도이급Tag DNA취합매농도등5개인자축개진행단인자우화.결과현시20μl PCR반응체계중,뢰공등협편기인조DNA RAPD최우반응체계위,최가온도36℃,인물농도위1.1 μmol/L,dNTP농도1.25 mmol/L,DNA모판농도3790 ng/L,Tag DNA취합매용량위5.625 U/L.통과구건해뢰공등협편기인조적RAPD우화체계,위접하거진일보적다양성분석、유전도보구건제공기출.