中国普外基础与临床杂志
中國普外基礎與臨床雜誌
중국보외기출여림상잡지
CHINESE JOURNAL OF BASES AND CLINICS IN GENERAL SURGERY
2010年
9期
917-921
,共5页
江良县%谭广%王忠裕%窦春鹏%单路娟
江良縣%譚廣%王忠裕%竇春鵬%單路娟
강량현%담엄%왕충유%두춘붕%단로연
树突状细胞%趋化因子%细胞骨架蛋白%K-ras突变多肽
樹突狀細胞%趨化因子%細胞骨架蛋白%K-ras突變多肽
수돌상세포%추화인자%세포골가단백%K-ras돌변다태
目的 探讨K-ras突变多肽致敏树突状细胞(DC)对细胞趋化因子CCL19、CCL22和细胞骨架蛋白fascin-1表达的影响.方法 联合应用重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素(IL)-4诱导培养外周血DC,收集培养7 d后的DC并分为未负载组(加入RPMI 1640培养液50μg/ml)和K-ras负载组(加入K-ras突变多肽50 μg/ml).流式细胞仪测定负载前、后DC表面标志CD1a、CD80及CD86;扫描电镜和透射电镜观察负载K-ras突变多肽后的DC形态结构;ELISA法检测2组DC培养上清液中IL-12、CCL19和CCL22的表达;Western blot法测定2组DC骨架蛋白fascin-1的表达.结果 ①K-ras突变多肽负载DC后,CD1a、CD80及CD86表面分子表达率明显高于负载前(P<0.01).②扫描电镜下见负载后的DC呈花瓣状、树枝样突起;透射电镜下见负载后的DC形态非常不规则,树枝状或毛刺状的突起明显增多.③K-ras负载组负载后不同时相(6、12、24及48 h)的IL-12、CCL19及CCL22的表达水平明显高于未负载组(P<0.01).④K-ras负载组fascin-1蛋白的表达水平也高于未负载组(P<0.01).结论 K-ras突变多肽能够促进DC成熟,并使细胞趋化因子和骨架蛋白表达水平增加,能够增强DC游走迁移.
目的 探討K-ras突變多肽緻敏樹突狀細胞(DC)對細胞趨化因子CCL19、CCL22和細胞骨架蛋白fascin-1錶達的影響.方法 聯閤應用重組人粒-巨噬細胞集落刺激因子和白細胞介素(IL)-4誘導培養外週血DC,收集培養7 d後的DC併分為未負載組(加入RPMI 1640培養液50μg/ml)和K-ras負載組(加入K-ras突變多肽50 μg/ml).流式細胞儀測定負載前、後DC錶麵標誌CD1a、CD80及CD86;掃描電鏡和透射電鏡觀察負載K-ras突變多肽後的DC形態結構;ELISA法檢測2組DC培養上清液中IL-12、CCL19和CCL22的錶達;Western blot法測定2組DC骨架蛋白fascin-1的錶達.結果 ①K-ras突變多肽負載DC後,CD1a、CD80及CD86錶麵分子錶達率明顯高于負載前(P<0.01).②掃描電鏡下見負載後的DC呈花瓣狀、樹枝樣突起;透射電鏡下見負載後的DC形態非常不規則,樹枝狀或毛刺狀的突起明顯增多.③K-ras負載組負載後不同時相(6、12、24及48 h)的IL-12、CCL19及CCL22的錶達水平明顯高于未負載組(P<0.01).④K-ras負載組fascin-1蛋白的錶達水平也高于未負載組(P<0.01).結論 K-ras突變多肽能夠促進DC成熟,併使細胞趨化因子和骨架蛋白錶達水平增加,能夠增彊DC遊走遷移.
목적 탐토K-ras돌변다태치민수돌상세포(DC)대세포추화인자CCL19、CCL22화세포골가단백fascin-1표체적영향.방법 연합응용중조인립-거서세포집락자격인자화백세포개소(IL)-4유도배양외주혈DC,수집배양7 d후적DC병분위미부재조(가입RPMI 1640배양액50μg/ml)화K-ras부재조(가입K-ras돌변다태50 μg/ml).류식세포의측정부재전、후DC표면표지CD1a、CD80급CD86;소묘전경화투사전경관찰부재K-ras돌변다태후적DC형태결구;ELISA법검측2조DC배양상청액중IL-12、CCL19화CCL22적표체;Western blot법측정2조DC골가단백fascin-1적표체.결과 ①K-ras돌변다태부재DC후,CD1a、CD80급CD86표면분자표체솔명현고우부재전(P<0.01).②소묘전경하견부재후적DC정화판상、수지양돌기;투사전경하견부재후적DC형태비상불규칙,수지상혹모자상적돌기명현증다.③K-ras부재조부재후불동시상(6、12、24급48 h)적IL-12、CCL19급CCL22적표체수평명현고우미부재조(P<0.01).④K-ras부재조fascin-1단백적표체수평야고우미부재조(P<0.01).결론 K-ras돌변다태능구촉진DC성숙,병사세포추화인자화골가단백표체수평증가,능구증강DC유주천이.
