中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
1期
37-41
,共5页
王占胜%韩雅玲%康建%张效林%陶杰%田孝祥%闫承慧
王佔勝%韓雅玲%康建%張效林%陶傑%田孝祥%閆承慧
왕점성%한아령%강건%장효림%도걸%전효상%염승혜
E1A 激活基因阻遏子%血管内皮细胞%VE-cadherin%细胞骨架%通透性%血管内皮生长因子
E1A 激活基因阻遏子%血管內皮細胞%VE-cadherin%細胞骨架%通透性%血管內皮生長因子
E1A 격활기인조알자%혈관내피세포%VE-cadherin%세포골가%통투성%혈관내피생장인자
目的:探讨E1A激活基因阻遏子(CREG)诱导的人血管内皮细胞(ECs)单层通透性改变中的作用及机制.方法:用CREG过表达及CREG表达下调的ECs为模型,Transwell chamber弥散模型观察ECs单层通透性的改变; 荧光倒置显微镜观察细胞骨架肌动蛋白F-actin及黏附连接蛋白VE-cadherin在ECs中的分布和形态学改变;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测ECs血管内皮生长因子(VEGF)分泌.结果:CREG过表达的ECs (EO组) 较EN组单层通透性明显增高 (P<0.05);CREG表达下调的ECs(ES组)较EN组单层通透性有所下降(P<0.05).与EN组相比较,EO组细胞中F-actin排列紊乱,形成大量应力纤维; ES组F-actin则主要呈细丝状分布于细胞周边,中央分布较少.同时,EO组VE-cadherin在细胞周边的正常拉链状结构减少或缺失,细胞间隙增宽;而ES组VE-cadherin在细胞周边呈正常拉链状分布,细胞之间连接紧密.ELISA检测显示EO组细胞上清中VEGF分泌较EN组明显增加(P<0.05);ES组VEGF分泌较EN组减少(P<0.05).应用VEGF中和抗体阻断后,CREG过表达引起的EO通透性增加的现象明显受到抑制.结论:CREG过表达可能通过VEGF介导的信号途径引起F-actin重构及VE-cadherin减少,使血管内皮细胞单层通透性增加.
目的:探討E1A激活基因阻遏子(CREG)誘導的人血管內皮細胞(ECs)單層通透性改變中的作用及機製.方法:用CREG過錶達及CREG錶達下調的ECs為模型,Transwell chamber瀰散模型觀察ECs單層通透性的改變; 熒光倒置顯微鏡觀察細胞骨架肌動蛋白F-actin及黏附連接蛋白VE-cadherin在ECs中的分佈和形態學改變;酶聯免疫吸附實驗(ELISA)檢測ECs血管內皮生長因子(VEGF)分泌.結果:CREG過錶達的ECs (EO組) 較EN組單層通透性明顯增高 (P<0.05);CREG錶達下調的ECs(ES組)較EN組單層通透性有所下降(P<0.05).與EN組相比較,EO組細胞中F-actin排列紊亂,形成大量應力纖維; ES組F-actin則主要呈細絲狀分佈于細胞週邊,中央分佈較少.同時,EO組VE-cadherin在細胞週邊的正常拉鏈狀結構減少或缺失,細胞間隙增寬;而ES組VE-cadherin在細胞週邊呈正常拉鏈狀分佈,細胞之間連接緊密.ELISA檢測顯示EO組細胞上清中VEGF分泌較EN組明顯增加(P<0.05);ES組VEGF分泌較EN組減少(P<0.05).應用VEGF中和抗體阻斷後,CREG過錶達引起的EO通透性增加的現象明顯受到抑製.結論:CREG過錶達可能通過VEGF介導的信號途徑引起F-actin重構及VE-cadherin減少,使血管內皮細胞單層通透性增加.
목적:탐토E1A격활기인조알자(CREG)유도적인혈관내피세포(ECs)단층통투성개변중적작용급궤제.방법:용CREG과표체급CREG표체하조적ECs위모형,Transwell chamber미산모형관찰ECs단층통투성적개변; 형광도치현미경관찰세포골가기동단백F-actin급점부련접단백VE-cadherin재ECs중적분포화형태학개변;매련면역흡부실험(ELISA)검측ECs혈관내피생장인자(VEGF)분비.결과:CREG과표체적ECs (EO조) 교EN조단층통투성명현증고 (P<0.05);CREG표체하조적ECs(ES조)교EN조단층통투성유소하강(P<0.05).여EN조상비교,EO조세포중F-actin배렬문란,형성대량응력섬유; ES조F-actin칙주요정세사상분포우세포주변,중앙분포교소.동시,EO조VE-cadherin재세포주변적정상랍련상결구감소혹결실,세포간극증관;이ES조VE-cadherin재세포주변정정상랍련상분포,세포지간련접긴밀.ELISA검측현시EO조세포상청중VEGF분비교EN조명현증가(P<0.05);ES조VEGF분비교EN조감소(P<0.05).응용VEGF중화항체조단후,CREG과표체인기적EO통투성증가적현상명현수도억제.결론:CREG과표체가능통과VEGF개도적신호도경인기F-actin중구급VE-cadherin감소,사혈관내피세포단층통투성증가.