华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
4期
393-397
,共5页
张苗苗%陶章生%陈婷婷%夏涛%彭良才%丰胜求
張苗苗%陶章生%陳婷婷%夏濤%彭良纔%豐勝求
장묘묘%도장생%진정정%하도%팽량재%봉성구
水稻%纤维素合酶%融合蛋白%多克隆抗体
水稻%纖維素閤酶%融閤蛋白%多剋隆抗體
수도%섬유소합매%융합단백%다극륭항체
纤维素合酶是参与纤维素β-1,4-葡聚糖链延伸的主要催化亚基,为进一步研究水稻中纤维素合酶的作用机理,采用DNA重组技术,将纤维素合酶基因CesA1、CesA2、CesA3克隆入表达载体pGEX-4T-3,构建重组质粒.在大肠杆菌JM109中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后在原核细胞中成功表达了3种纤维素合酶的融合蛋白,通过谷胱甘肽巯基转移酶(GST)纯化系统获得融合蛋白,以此作为抗原免疫家兔,制备出效价高、特异性强的多克隆抗体.
纖維素閤酶是參與纖維素β-1,4-葡聚糖鏈延伸的主要催化亞基,為進一步研究水稻中纖維素閤酶的作用機理,採用DNA重組技術,將纖維素閤酶基因CesA1、CesA2、CesA3剋隆入錶達載體pGEX-4T-3,構建重組質粒.在大腸桿菌JM109中,經異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導後在原覈細胞中成功錶達瞭3種纖維素閤酶的融閤蛋白,通過穀胱甘肽巰基轉移酶(GST)純化繫統穫得融閤蛋白,以此作為抗原免疫傢兔,製備齣效價高、特異性彊的多剋隆抗體.
섬유소합매시삼여섬유소β-1,4-포취당련연신적주요최화아기,위진일보연구수도중섬유소합매적작용궤리,채용DNA중조기술,장섬유소합매기인CesA1、CesA2、CesA3극륭입표체재체pGEX-4T-3,구건중조질립.재대장간균JM109중,경이병기류대반유당감(IPTG)유도후재원핵세포중성공표체료3충섬유소합매적융합단백,통과곡광감태구기전이매(GST)순화계통획득융합단백,이차작위항원면역가토,제비출효개고、특이성강적다극륭항체.
