时珍国医国药
時珍國醫國藥
시진국의국약
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH
2012年
1期
71-74
,共4页
当归补血汤超滤物%人脐静脉内皮细胞%过氧化氢%血管紧张素Ⅱ受体1
噹歸補血湯超濾物%人臍靜脈內皮細胞%過氧化氫%血管緊張素Ⅱ受體1
당귀보혈탕초려물%인제정맥내피세포%과양화경%혈관긴장소Ⅱ수체1
目的 研究当归补血汤超滤物对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilieal vein endothelial cells,HUVECs) ECV-304氧化损伤的影响,并初步探讨其作用机制.方法 通过酶消化法对离体的人脐静脉内皮细胞系ECV - 304细胞进行消化传代,建立过氧化氢(peroxide hydrogen,H2O2)诱导的ECV -304细胞氧化损伤模型.采用超滤技术对当归红芪合剂进行分离与纯化,以不同分子量(2万以下、5万以下、10万以下)且浓度均为15.0 g/L的当归红芪超滤膜提取物作用于氧化损伤的ECV - 304细胞,黄嘌呤氧化酶法检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,硫代巴比妥酸(TBA)法检测细胞内丙二醛(malondialdeyde,MDA)活力,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分析细胞周期的变化,RT - PCR检测细胞内AT1 mRNA的表达.结果 经0.5mmol/L H2O2刺激后细胞活性明显降低,SOD活力明显降低,MDA活力明显提高,G0/G1期细胞的数目明显增加,S期细胞的数目明显减少,AT1 mRNA表达增加(P＜0.05)；与H2O2组相比,当归红芪超滤膜提取物可以增强H2O2诱导ECV -304细胞氧化损伤的细胞活性,增加细胞的存活率且以作用72 h为佳,提高氧化损伤的ECV - 304细胞的SOD活力,降低氧化损伤的ECV - 304细胞的MDA活力,促进氧化损伤的ECV - 304细胞向S期转变,减少细胞内AT1 mRNA表达(P ＜0.01,P＜0.05).结论 当归补血汤超滤物对氧化损伤ECV - 304细胞的保护作用可能与其提高了抗氧化酶活性,降低了脂质过氧化物活性,促进了内皮细胞DNA合成复制及减少了细胞内AT1 mRNA的表达有关.
目的 研究噹歸補血湯超濾物對H2O2誘導人臍靜脈內皮細胞(human umbilieal vein endothelial cells,HUVECs) ECV-304氧化損傷的影響,併初步探討其作用機製.方法 通過酶消化法對離體的人臍靜脈內皮細胞繫ECV - 304細胞進行消化傳代,建立過氧化氫(peroxide hydrogen,H2O2)誘導的ECV -304細胞氧化損傷模型.採用超濾技術對噹歸紅芪閤劑進行分離與純化,以不同分子量(2萬以下、5萬以下、10萬以下)且濃度均為15.0 g/L的噹歸紅芪超濾膜提取物作用于氧化損傷的ECV - 304細胞,黃嘌呤氧化酶法檢測細胞內超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,硫代巴比妥痠(TBA)法檢測細胞內丙二醛(malondialdeyde,MDA)活力,流式細胞儀(flow cytometry,FCM)分析細胞週期的變化,RT - PCR檢測細胞內AT1 mRNA的錶達.結果 經0.5mmol/L H2O2刺激後細胞活性明顯降低,SOD活力明顯降低,MDA活力明顯提高,G0/G1期細胞的數目明顯增加,S期細胞的數目明顯減少,AT1 mRNA錶達增加(P＜0.05)；與H2O2組相比,噹歸紅芪超濾膜提取物可以增彊H2O2誘導ECV -304細胞氧化損傷的細胞活性,增加細胞的存活率且以作用72 h為佳,提高氧化損傷的ECV - 304細胞的SOD活力,降低氧化損傷的ECV - 304細胞的MDA活力,促進氧化損傷的ECV - 304細胞嚮S期轉變,減少細胞內AT1 mRNA錶達(P ＜0.01,P＜0.05).結論 噹歸補血湯超濾物對氧化損傷ECV - 304細胞的保護作用可能與其提高瞭抗氧化酶活性,降低瞭脂質過氧化物活性,促進瞭內皮細胞DNA閤成複製及減少瞭細胞內AT1 mRNA的錶達有關.
목적 연구당귀보혈탕초려물대H2O2유도인제정맥내피세포(human umbilieal vein endothelial cells,HUVECs) ECV-304양화손상적영향,병초보탐토기작용궤제.방법 통과매소화법대리체적인제정맥내피세포계ECV - 304세포진행소화전대,건립과양화경(peroxide hydrogen,H2O2)유도적ECV -304세포양화손상모형.채용초려기술대당귀홍기합제진행분리여순화,이불동분자량(2만이하、5만이하、10만이하)차농도균위15.0 g/L적당귀홍기초려막제취물작용우양화손상적ECV - 304세포,황표령양화매법검측세포내초양화물기화매(superoxide dismutase,SOD)활력,류대파비타산(TBA)법검측세포내병이철(malondialdeyde,MDA)활력,류식세포의(flow cytometry,FCM)분석세포주기적변화,RT - PCR검측세포내AT1 mRNA적표체.결과 경0.5mmol/L H2O2자격후세포활성명현강저,SOD활력명현강저,MDA활력명현제고,G0/G1기세포적수목명현증가,S기세포적수목명현감소,AT1 mRNA표체증가(P＜0.05)；여H2O2조상비,당귀홍기초려막제취물가이증강H2O2유도ECV -304세포양화손상적세포활성,증가세포적존활솔차이작용72 h위가,제고양화손상적ECV - 304세포적SOD활력,강저양화손상적ECV - 304세포적MDA활력,촉진양화손상적ECV - 304세포향S기전변,감소세포내AT1 mRNA표체(P ＜0.01,P＜0.05).결론 당귀보혈탕초려물대양화손상ECV - 304세포적보호작용가능여기제고료항양화매활성,강저료지질과양화물활성,촉진료내피세포DNA합성복제급감소료세포내AT1 mRNA적표체유관.
