南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
2期
115-119
,共5页
剧世强%赵雪瑶%张妍婷%孔妍%李建坤%芮荣
劇世彊%趙雪瑤%張妍婷%孔妍%李建坤%芮榮
극세강%조설요%장연정%공연%리건곤%예영
种间核移植%胚胎%玻璃化冷冻
種間覈移植%胚胎%玻璃化冷凍
충간핵이식%배태%파리화냉동
以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响.结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与猪pSCNT胚胎相比无显著差异(P＞0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1％对56.8％,P＜0.05).采用ES液作为冷冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显著高于EFS组(28.6％和22.7％对9.5％,P＜0.05)；与其他发育阶段相比,2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎可获得最高的冻后存活率；小鼠-猪iSCNT各期胚胎的冻后存活率均低于pSCNT组,但无统计学差异(P＞0.05).结果表明,以ES液为冷冻保护液,选择2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎进行OPS法冷冻保存,可获得相对较高的冻后存活率,但iSCNT胚胎的冻后存活率和体外发育能力均较pSCNT胚胎低.
以小鼠卵丘細胞為供覈細胞,豬體外成熟去覈卵母細胞為受體,構建小鼠-豬種間體細胞覈移植(iSCNT)胚胎,併以豬體細胞覈移植(pSCNT)胚胎為對照,採用開放式拉長細管(OPS)法對所穫iSCNT胚胎進行冷凍保存,研究不同冷凍保護液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同髮育階段(2-、4-、8-細胞)對冷凍效果的影響.結果顯示:小鼠-豬iSCNT胚胎卵裂率與豬pSCNT胚胎相比無顯著差異(P＞0.05),但其8-細胞髮育率則明顯較低(28.1％對56.8％,P＜0.05).採用ES液作為冷凍保護液,iSCNT胚胎凍後存活率與EDFS組相似,但顯著高于EFS組(28.6％和22.7％對9.5％,P＜0.05)；與其他髮育階段相比,2-細胞期小鼠-豬iSCNT胚胎可穫得最高的凍後存活率；小鼠-豬iSCNT各期胚胎的凍後存活率均低于pSCNT組,但無統計學差異(P＞0.05).結果錶明,以ES液為冷凍保護液,選擇2-細胞期小鼠-豬iSCNT胚胎進行OPS法冷凍保存,可穫得相對較高的凍後存活率,但iSCNT胚胎的凍後存活率和體外髮育能力均較pSCNT胚胎低.
이소서란구세포위공핵세포,저체외성숙거핵란모세포위수체,구건소서-저충간체세포핵이식(iSCNT)배태,병이저체세포핵이식(pSCNT)배태위대조,채용개방식랍장세관(OPS)법대소획iSCNT배태진행냉동보존,연구불동냉동보호액(ES、EFS화EDFS)급배태불동발육계단(2-、4-、8-세포)대냉동효과적영향.결과현시:소서-저iSCNT배태란렬솔여저pSCNT배태상비무현저차이(P＞0.05),단기8-세포발육솔칙명현교저(28.1％대56.8％,P＜0.05).채용ES액작위냉동보호액,iSCNT배태동후존활솔여EDFS조상사,단현저고우EFS조(28.6％화22.7％대9.5％,P＜0.05)；여기타발육계단상비,2-세포기소서-저iSCNT배태가획득최고적동후존활솔；소서-저iSCNT각기배태적동후존활솔균저우pSCNT조,단무통계학차이(P＞0.05).결과표명,이ES액위냉동보호액,선택2-세포기소서-저iSCNT배태진행OPS법냉동보존,가획득상대교고적동후존활솔,단iSCNT배태적동후존활솔화체외발육능력균교pSCNT배태저.
