中国计划生育学杂志
中國計劃生育學雜誌
중국계화생육학잡지
CHINESE JOURNAL OF FAMILY PLANNING
2012年
6期
410-414
,共5页
李芳芳%郭永%崔芳芳%丁宁%张嵘%邹检平
李芳芳%郭永%崔芳芳%丁寧%張嶸%鄒檢平
리방방%곽영%최방방%정저%장영%추검평
脆性X综合征%FMRP重组表达%蛋白纯化
脆性X綜閤徵%FMRP重組錶達%蛋白純化
취성X종합정%FMRP중조표체%단백순화
目的:在大肠杆菌中对脆性X智力低下蛋白(FMRP)进行重组表达,获得高产量及高纯度的可溶性重组蛋白.方法:以人脑cDNA文库为模板,PCR扩增FMR1基因后将其克隆至融合表达载体pGEX - 6P -1中,重组载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3) pLysS,并用IPTG进行诱导表达.应用谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B进行亲和层析纯化GST - FMRP融合蛋白,并以SDS - PAGE电泳和Western blot对融合蛋白的表达进行检测.结果:亲和纯化后的融合蛋白经FMRP及GST单抗分别进行Western blot鉴定为GST - FMRP融合蛋白.结论:大肠杆菌中FMRP ISO10的重组表达产量高,纯化得到可溶性重组蛋白,为FMRP抗体的制备及FXS检测试剂盒的开发奠定基础.
目的:在大腸桿菌中對脆性X智力低下蛋白(FMRP)進行重組錶達,穫得高產量及高純度的可溶性重組蛋白.方法:以人腦cDNA文庫為模闆,PCR擴增FMR1基因後將其剋隆至融閤錶達載體pGEX - 6P -1中,重組載體轉化進入大腸桿菌BL21(DE3) pLysS,併用IPTG進行誘導錶達.應用穀胱甘肽-瓊脂糖凝膠4B進行親和層析純化GST - FMRP融閤蛋白,併以SDS - PAGE電泳和Western blot對融閤蛋白的錶達進行檢測.結果:親和純化後的融閤蛋白經FMRP及GST單抗分彆進行Western blot鑒定為GST - FMRP融閤蛋白.結論:大腸桿菌中FMRP ISO10的重組錶達產量高,純化得到可溶性重組蛋白,為FMRP抗體的製備及FXS檢測試劑盒的開髮奠定基礎.
목적:재대장간균중대취성X지력저하단백(FMRP)진행중조표체,획득고산량급고순도적가용성중조단백.방법:이인뇌cDNA문고위모판,PCR확증FMR1기인후장기극륭지융합표체재체pGEX - 6P -1중,중조재체전화진입대장간균BL21(DE3) pLysS,병용IPTG진행유도표체.응용곡광감태-경지당응효4B진행친화층석순화GST - FMRP융합단백,병이SDS - PAGE전영화Western blot대융합단백적표체진행검측.결과:친화순화후적융합단백경FMRP급GST단항분별진행Western blot감정위GST - FMRP융합단백.결론:대장간균중FMRP ISO10적중조표체산량고,순화득도가용성중조단백,위FMRP항체적제비급FXS검측시제합적개발전정기출.
