眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2008年
9期
689-692
,共4页
罗琳%邓江云%黄强%吴开力
囉琳%鄧江雲%黃彊%吳開力
라림%산강운%황강%오개력
HTLV-I Tax%Müller细胞%蛋白质组学
HTLV-I Tax%Müller細胞%蛋白質組學
HTLV-I Tax%Müller세포%단백질조학
目的 观察体外人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-I)Tax蛋白与Moiler细胞蛋白结合及其靶蛋白组成成分.方法 用含Tax蛋白eDNA的原核表达载体PGEX-3X-GST-Tax转化大肠杆菌,诱导表达并提取纯化GST-Tax融合蛋白;细胞外GST-Tax融合蛋白与Müller细胞蛋白结合,GS4B下拉(pull-down)与GST-Tax结合的蛋白;应用二维凝胶电泳、质谱分析(MALDI-Tof-Ms)和免疫印迹分析等方法分析鉴定结合的蛋白.结果 通过与对照组比较,在二维凝胶电泳上观察到多个差异蛋白质斑点,经质谱分析鉴定出10个差异蛋白质为Tax的候选靶蛋白,经免疫印迹,初步证实Tax蛋白能与ENO1相结合.结论 初步分离鉴定出Müller细胞中的ENO1等蛋白质可能为Tax蛋白的靶蛋白分子.
目的 觀察體外人類嗜T淋巴細胞病毒(HTLV-I)Tax蛋白與Moiler細胞蛋白結閤及其靶蛋白組成成分.方法 用含Tax蛋白eDNA的原覈錶達載體PGEX-3X-GST-Tax轉化大腸桿菌,誘導錶達併提取純化GST-Tax融閤蛋白;細胞外GST-Tax融閤蛋白與Müller細胞蛋白結閤,GS4B下拉(pull-down)與GST-Tax結閤的蛋白;應用二維凝膠電泳、質譜分析(MALDI-Tof-Ms)和免疫印跡分析等方法分析鑒定結閤的蛋白.結果 通過與對照組比較,在二維凝膠電泳上觀察到多箇差異蛋白質斑點,經質譜分析鑒定齣10箇差異蛋白質為Tax的候選靶蛋白,經免疫印跡,初步證實Tax蛋白能與ENO1相結閤.結論 初步分離鑒定齣Müller細胞中的ENO1等蛋白質可能為Tax蛋白的靶蛋白分子.
목적 관찰체외인류기T림파세포병독(HTLV-I)Tax단백여Moiler세포단백결합급기파단백조성성분.방법 용함Tax단백eDNA적원핵표체재체PGEX-3X-GST-Tax전화대장간균,유도표체병제취순화GST-Tax융합단백;세포외GST-Tax융합단백여Müller세포단백결합,GS4B하랍(pull-down)여GST-Tax결합적단백;응용이유응효전영、질보분석(MALDI-Tof-Ms)화면역인적분석등방법분석감정결합적단백.결과 통과여대조조비교,재이유응효전영상관찰도다개차이단백질반점,경질보분석감정출10개차이단백질위Tax적후선파단백,경면역인적,초보증실Tax단백능여ENO1상결합.결론 초보분리감정출Müller세포중적ENO1등단백질가능위Tax단백적파단백분자.