中国分子心脏病学杂志
中國分子心髒病學雜誌
중국분자심장병학잡지
MOLECULAR CARDIOLOGY OF CHINA
2005年
2期
452-456
,共5页
戴勇%彭武建%李体远%杜珙%徐卓佳
戴勇%彭武建%李體遠%杜珙%徐卓佳
대용%팽무건%리체원%두공%서탁가
人组织激肽释放酶基因%肾血管性高血压%基因治疗
人組織激肽釋放酶基因%腎血管性高血壓%基因治療
인조직격태석방매기인%신혈관성고혈압%기인치료
目的构建重组人组织激肽释放酶基因真核表达载体并研究其骨骼肌注射对高血压大鼠的降压效应.方法以pBluescripeⅡKSKLK(+)为模板用PCR扩增人组织激肽释放酶基因,将其定向克隆至pcDNA3载体上,形成重组质粒pcDNA3/KLK,并经酶切和测序鉴定.给"两肾一夹"肾性高血压大鼠的股四头肌注入1000 μg pcDNA3/KLK,,随后给予100 V、1 Hz、40 ms电刺激6次,并用RT-PCR、Western杂交检测人KLKcDNA在体内的表达.尾套法测血压每周2次.结果一次肌肉注射人组织激肽释放酶cDNA可明显延缓"两肾一夹"肾性高血压大鼠的血压升高;能降低血压达8～21 mm Hg.局部肌肉组织的信使核糖核酸(mRNA)和KLK表达阳性.结论成功构建了pcD-NA3/KLK真核表达载体,肌肉注射人组织激肽释放酶基因可引起"两肾一夹"肾性高血压大鼠血压的持续性下降,显示了人KLK基因对高血压患者降压治疗的可能性.
目的構建重組人組織激肽釋放酶基因真覈錶達載體併研究其骨骼肌註射對高血壓大鼠的降壓效應.方法以pBluescripeⅡKSKLK(+)為模闆用PCR擴增人組織激肽釋放酶基因,將其定嚮剋隆至pcDNA3載體上,形成重組質粒pcDNA3/KLK,併經酶切和測序鑒定.給"兩腎一夾"腎性高血壓大鼠的股四頭肌註入1000 μg pcDNA3/KLK,,隨後給予100 V、1 Hz、40 ms電刺激6次,併用RT-PCR、Western雜交檢測人KLKcDNA在體內的錶達.尾套法測血壓每週2次.結果一次肌肉註射人組織激肽釋放酶cDNA可明顯延緩"兩腎一夾"腎性高血壓大鼠的血壓升高;能降低血壓達8～21 mm Hg.跼部肌肉組織的信使覈糖覈痠(mRNA)和KLK錶達暘性.結論成功構建瞭pcD-NA3/KLK真覈錶達載體,肌肉註射人組織激肽釋放酶基因可引起"兩腎一夾"腎性高血壓大鼠血壓的持續性下降,顯示瞭人KLK基因對高血壓患者降壓治療的可能性.
목적구건중조인조직격태석방매기인진핵표체재체병연구기골격기주사대고혈압대서적강압효응.방법이pBluescripeⅡKSKLK(+)위모판용PCR확증인조직격태석방매기인,장기정향극륭지pcDNA3재체상,형성중조질립pcDNA3/KLK,병경매절화측서감정.급"량신일협"신성고혈압대서적고사두기주입1000 μg pcDNA3/KLK,,수후급여100 V、1 Hz、40 ms전자격6차,병용RT-PCR、Western잡교검측인KLKcDNA재체내적표체.미투법측혈압매주2차.결과일차기육주사인조직격태석방매cDNA가명현연완"량신일협"신성고혈압대서적혈압승고;능강저혈압체8～21 mm Hg.국부기육조직적신사핵당핵산(mRNA)화KLK표체양성.결론성공구건료pcD-NA3/KLK진핵표체재체,기육주사인조직격태석방매기인가인기"량신일협"신성고혈압대서혈압적지속성하강,현시료인KLK기인대고혈압환자강압치료적가능성.
