CAJ | 학술논문

在广东省采集的果子狸样品共192份,处理后接种Vero-E6细胞,从中分离到1株病毒.该病毒在Vero-E6细胞上盲传至第4代开始出现细胞病变,表现为细胞内颗粒增多,细胞收缩、变圆,最后细胞从瓶壁脱落.经电镜观察发现,病毒粒子无囊膜,有双层衣壳,呈正二十面体对称,具有呼肠孤病毒的形态特征,将病毒命名为MaskedPalm Civet/(China/2004(MPC/04).红细胞凝集试验表明该病毒能凝集健康人O型血红细胞,不能凝集SPF鸡、实验用普通级牛、大鼠和豚鼠的红细胞,这与哺乳动物呼肠孤病毒血清1型的红细胞凝集谱相符.理化特性试验表明该病毒对氯仿有抵抗力;能耐受Ph3.0的酸性环境;50℃水浴1h病毒未丧失感染能力;1 mol/L MgCl2能提高病毒对热的抵抗力.为了进一步从分子水平上证实该病毒是呼肠孤病毒,用哺乳动物呼肠孤病毒特异性引物进行反转录-聚合酶链式反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR),扩增得到了预期大小的片段.测序结果经NCBI BLAST比较,选取同源性较高者进行序列同源性分析,发现该片段与哺乳动物呼肠孤病毒血清1型参考毒株核苷酸同源性最高.以上结果证明该病毒为呼肠孤病毒科的成员.
재광동성채집적과자리양품공192빈,처리후접충Vero-E6세포,종중분리도1주병독.해병독재Vero-E6세포상맹전지제4대개시출현세포병변,표현위세포내과립증다,세포수축、변원,최후세포종병벽탈락.경전경관찰발현,병독입자무낭막,유쌍층의각,정정이십면체대칭,구유호장고병독적형태특정,장병독명명위MaskedPalm Civet/(China/2004(MPC/04).홍세포응집시험표명해병독능응집건강인O형혈홍세포,불능응집SPF계、실험용보통급우、대서화돈서적홍세포,저여포유동물호장고병독혈청1형적홍세포응집보상부.이화특성시험표명해병독대록방유저항력;능내수Ph3.0적산성배경;50℃수욕1h병독미상실감염능력;1 mol/L MgCl2능제고병독대열적저항력.위료진일보종분자수평상증실해병독시호장고병독,용포유동물호장고병독특이성인물진행반전록-취합매련식반응(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR),확증득도료예기대소적편단.측서결과경NCBI BLAST비교,선취동원성교고자진행서렬동원성분석,발현해편단여포유동물호장고병독혈청1형삼고독주핵감산동원성최고.이상결과증명해병독위호장고병독과적성원.