临床和实验医学杂志
臨床和實驗醫學雜誌
림상화실험의학잡지
JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL MEDICINE
2010年
1期
40-41
,共2页
HBV-DNA模板%直接煮沸法%碱裂解法%浓缩碱裂解法%碱裂解3倍量提取法
HBV-DNA模闆%直接煮沸法%堿裂解法%濃縮堿裂解法%堿裂解3倍量提取法
HBV-DNA모판%직접자비법%감렬해법%농축감렬해법%감렬해3배량제취법
目的 比较直接煮沸法、碱裂解法、浓缩碱裂解法和碱裂解3倍量提取法四种提取法提取样本核酸的差异;选择简便、可靠的检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)提取方法.方法 运用中山医科大学达安基因股份有限公司生产的HBV-DNA试剂盒中推荐的浓缩碱裂解法,与直接煮沸法、碱裂解法、碱裂解3倍量提取法,分别提取血清样本核酸模板,用美国MJ实时荧光定量PCR仪检测HBV-DNA,对结果进行对比分析.结果 共89例乙肝表面抗原(HBsAg)阳性患者血清,浓缩碱裂解法和碱裂解3倍量提取法检测,两者均有62例HBV-DNA阳性(＞1 000拷贝/ml定性为阳性)阳性率69.6%,阳性拷贝/ml均值用对数形式表示分别为(6.652±1.301)和(6.601±1.282),两者间结果无明显差异(P＞0.05);直接煮沸法检测出47例阳性(均在上述62例中)阳性率52.8%;碱裂解法测出57例阳性(均在上述62例中)阳性率64.0%,阳性拷贝/ml均值与浓缩碱裂解法和碱裂解3倍量提取法相比较,阳性检出率较低,有非常显著性差异(P＜0.01)和显著性差异(P＜0.05).结论 碱裂解3倍量提取法操作简单,省时、省材料,重复性好,阳性检出率与浓缩碱裂解法一致,建议使用碱裂解3倍量提取法检测HBV-DNA.
目的 比較直接煮沸法、堿裂解法、濃縮堿裂解法和堿裂解3倍量提取法四種提取法提取樣本覈痠的差異;選擇簡便、可靠的檢測乙肝病毒DNA(HBV-DNA)提取方法.方法 運用中山醫科大學達安基因股份有限公司生產的HBV-DNA試劑盒中推薦的濃縮堿裂解法,與直接煮沸法、堿裂解法、堿裂解3倍量提取法,分彆提取血清樣本覈痠模闆,用美國MJ實時熒光定量PCR儀檢測HBV-DNA,對結果進行對比分析.結果 共89例乙肝錶麵抗原(HBsAg)暘性患者血清,濃縮堿裂解法和堿裂解3倍量提取法檢測,兩者均有62例HBV-DNA暘性(＞1 000拷貝/ml定性為暘性)暘性率69.6%,暘性拷貝/ml均值用對數形式錶示分彆為(6.652±1.301)和(6.601±1.282),兩者間結果無明顯差異(P＞0.05);直接煮沸法檢測齣47例暘性(均在上述62例中)暘性率52.8%;堿裂解法測齣57例暘性(均在上述62例中)暘性率64.0%,暘性拷貝/ml均值與濃縮堿裂解法和堿裂解3倍量提取法相比較,暘性檢齣率較低,有非常顯著性差異(P＜0.01)和顯著性差異(P＜0.05).結論 堿裂解3倍量提取法操作簡單,省時、省材料,重複性好,暘性檢齣率與濃縮堿裂解法一緻,建議使用堿裂解3倍量提取法檢測HBV-DNA.
목적 비교직접자비법、감렬해법、농축감렬해법화감렬해3배량제취법사충제취법제취양본핵산적차이;선택간편、가고적검측을간병독DNA(HBV-DNA)제취방법.방법 운용중산의과대학체안기인고빈유한공사생산적HBV-DNA시제합중추천적농축감렬해법,여직접자비법、감렬해법、감렬해3배량제취법,분별제취혈청양본핵산모판,용미국MJ실시형광정량PCR의검측HBV-DNA,대결과진행대비분석.결과 공89례을간표면항원(HBsAg)양성환자혈청,농축감렬해법화감렬해3배량제취법검측,량자균유62례HBV-DNA양성(＞1 000고패/ml정성위양성)양성솔69.6%,양성고패/ml균치용대수형식표시분별위(6.652±1.301)화(6.601±1.282),량자간결과무명현차이(P＞0.05);직접자비법검측출47례양성(균재상술62례중)양성솔52.8%;감렬해법측출57례양성(균재상술62례중)양성솔64.0%,양성고패/ml균치여농축감렬해법화감렬해3배량제취법상비교,양성검출솔교저,유비상현저성차이(P＜0.01)화현저성차이(P＜0.05).결론 감렬해3배량제취법조작간단,성시、성재료,중복성호,양성검출솔여농축감렬해법일치,건의사용감렬해3배량제취법검측HBV-DNA.
