CAJ | 학술논문

目的:观察P2X,嘌呤能受体在体外培养的Cajal间质细胞(ICC)的表达及高糖的影响,探讨P2X7嘌呤能受体在糖尿病胃肠功能紊乱的细胞机制.方法:以小鼠小肠组织为来源,联合使用机械分离法和酶解法分离ICC,培养在50 mL/LCO2温箱里.同时应用ICC特异的c-Kit抗体和P2X,受体抗体进行免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下进行鉴定,以确定P2X7受体是否表达于ICC.实验分组:正常对照组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L),高糖组(葡萄糖浓度为33mmol/L).通过倒置显微镜观察细胞形态,RT-PCR对P2X7和c-Kit受体的表达进行比较.结果:激光共聚焦显微镜下P2X7受体在c-Kit抗体阳性的细胞上的免疫荧光染色是阳性的;与正常组比较,加入葡萄糖后的ICC细胞变大,突起变短,与周围细胞的网络连接减少;RT-PCR结果显示P2X7受体表达于ICC,加入高糖后的ICC的c-Kit受体表达减弱,而P2X7受体的表达是增强的.结论:P2X7受体表达于体外培养的ICC上,高糖使ICC的形态发生了改变、减弱了c-Kit的表达、加强了P2X7受体的表达.这可能在糖尿病胃肠功能紊乱的发生中发挥一定的作用.
목적:관찰P2X,표령능수체재체외배양적Cajal간질세포(ICC)적표체급고당적영향,탐토P2X7표령능수체재당뇨병위장공능문란적세포궤제.방법:이소서소장조직위래원,연합사용궤계분리법화매해법분리ICC,배양재50 mL/LCO2온상리.동시응용ICC특이적c-Kit항체화P2X,수체항체진행면역형광염색,재격광공취초현미경하진행감정,이학정P2X7수체시부표체우ICC.실험분조:정상대조조(포도당농도위5.5 mmol/L),고당조(포도당농도위33mmol/L).통과도치현미경관찰세포형태,RT-PCR대P2X7화c-Kit수체적표체진행비교.결과:격광공취초현미경하P2X7수체재c-Kit항체양성적세포상적면역형광염색시양성적;여정상조비교,가입포도당후적ICC세포변대,돌기변단,여주위세포적망락련접감소;RT-PCR결과현시P2X7수체표체우ICC,가입고당후적ICC적c-Kit수체표체감약,이P2X7수체적표체시증강적.결론:P2X7수체표체우체외배양적ICC상,고당사ICC적형태발생료개변、감약료c-Kit적표체、가강료P2X7수체적표체.저가능재당뇨병위장공능문란적발생중발휘일정적작용.