CAJ | 학술논문

背景:在缺血性疾病中,机体的代偿性反应包括细小动脉形成和血管新生,而内皮祖细胞在其中发挥着重要的作用,参与了机体多种生理、病理性血管重建过程.目前对内皮祖细胞的来源、生物学特性还存在许多争议.目的:分离培养人外周血、脐带血、骨髓以及脐带来源的内皮祖细胞,并对其生物学特性进行比较.方法:采用密度梯度离心法分离人外周血、脐带血以及骨髓单个核细胞进行贴壁培养,脐带来源的内皮祖细胞通过植块贴壁培养或胶原酶消化脐静脉内膜获得的单个核细胞进行贴壁培养.对获得的贴壁细胞进行细胞形态学、增殖活力、细胞周期、免疫表型的检测.结果与结论:①外周血与脐带血来源的贴壁细胞呈长梭形,集落状生长,其上附有成簇圆形细胞,随着培养时间延长,圆形细胞渐脱落,梭形细胞无明显增殖趋势,消化后细胞不能传代;流式显示细胞高表达CD45,部分表达KDR,但不表达CD31.②骨髓和脐带来源的贴壁细胞呈短梭形、多角形;传代后细胞增殖迅速,且细胞形态与增殖活力没有明显下降;多数细胞处于G0/G1期;流式检测显示细胞均不表达CD14、CD45,也不表达CD106、HLA-DR,但高表达CD44、CD90、CD62E、CD73、CD95、CD105;部分表达内皮系标记KDR、vWF;酶消化法获得的脐带内皮祖细胞还表达CD31;共聚焦显微镜扫描显示细胞具有吸收ac-LDL并结合UEA-1的能力.结果说明外周血、脐带血、骨髓与脐带组织中可分离培养出分化程度、增殖活力不同的内皮祖细胞.
배경:재결혈성질병중,궤체적대상성반응포괄세소동맥형성화혈관신생,이내피조세포재기중발휘착중요적작용,삼여료궤체다충생리、병이성혈관중건과정.목전대내피조세포적래원、생물학특성환존재허다쟁의.목적:분리배양인외주혈、제대혈、골수이급제대래원적내피조세포,병대기생물학특성진행비교.방법:채용밀도제도리심법분리인외주혈、제대혈이급골수단개핵세포진행첩벽배양,제대래원적내피조세포통과식괴첩벽배양혹효원매소화제정맥내막획득적단개핵세포진행첩벽배양.대획득적첩벽세포진행세포형태학、증식활력、세포주기、면역표형적검측.결과여결론:①외주혈여제대혈래원적첩벽세포정장사형,집락상생장,기상부유성족원형세포,수착배양시간연장,원형세포점탈락,사형세포무명현증식추세,소화후세포불능전대;류식현시세포고표체CD45,부분표체KDR,단불표체CD31.②골수화제대래원적첩벽세포정단사형、다각형;전대후세포증식신속,차세포형태여증식활력몰유명현하강;다수세포처우G0/G1기;류식검측현시세포균불표체CD14、CD45,야불표체CD106、HLA-DR,단고표체CD44、CD90、CD62E、CD73、CD95、CD105;부분표체내피계표기KDR、vWF;매소화법획득적제대내피조세포환표체CD31;공취초현미경소묘현시세포구유흡수ac-LDL병결합UEA-1적능력.결과설명외주혈、제대혈、골수여제대조직중가분리배양출분화정도、증식활력불동적내피조세포.