西北药学杂志
西北藥學雜誌
서북약학잡지
2010年
4期
265-267
,共3页
王博%侯大斌%徐敏%刘向鸿
王博%侯大斌%徐敏%劉嚮鴻
왕박%후대빈%서민%류향홍
九眼独活%DNA提取%ISSR-PCR反应体系%引物筛选
九眼獨活%DNA提取%ISSR-PCR反應體繫%引物篩選
구안독활%DNA제취%ISSR-PCR반응체계%인물사선
目的 探讨九眼独活基因组DNA提取方法 、ISSR反应体系优化及引物筛选,为研究九眼独活居群遗传多样性及原药材DNA鉴定奠定基础.方法 采用改良的CTAB法与常规CTAB法对九眼独活的基因组进行提取,通过紫外、电泳、PCR-ISSR检测方法 进行比较.结果实验表明,改良的CTAB法得到的DNA浓度和纯度较高,并可很好地应用于ISSR分子标记分析;以Mg2+、dNTP、引物和聚合酶建立L9(34)正交设计,并同时考察退火温度和模板浓度,建立适宜的25 μL ISSR-PCR体系为:模板 30 ng,Mg2+ 3.5 mmol·L-1,dNTP 0.6 mmol·L-1,引物0.4 μmol·L-1,Taq酶1 U.结论 以此体系为基础进行引物筛选,在40条ISSR引物中筛选出13 条扩增条带清晰、多态性较高、重复性好的引物.
目的 探討九眼獨活基因組DNA提取方法 、ISSR反應體繫優化及引物篩選,為研究九眼獨活居群遺傳多樣性及原藥材DNA鑒定奠定基礎.方法 採用改良的CTAB法與常規CTAB法對九眼獨活的基因組進行提取,通過紫外、電泳、PCR-ISSR檢測方法 進行比較.結果實驗錶明,改良的CTAB法得到的DNA濃度和純度較高,併可很好地應用于ISSR分子標記分析;以Mg2+、dNTP、引物和聚閤酶建立L9(34)正交設計,併同時攷察退火溫度和模闆濃度,建立適宜的25 μL ISSR-PCR體繫為:模闆 30 ng,Mg2+ 3.5 mmol·L-1,dNTP 0.6 mmol·L-1,引物0.4 μmol·L-1,Taq酶1 U.結論 以此體繫為基礎進行引物篩選,在40條ISSR引物中篩選齣13 條擴增條帶清晰、多態性較高、重複性好的引物.
목적 탐토구안독활기인조DNA제취방법 、ISSR반응체계우화급인물사선,위연구구안독활거군유전다양성급원약재DNA감정전정기출.방법 채용개량적CTAB법여상규CTAB법대구안독활적기인조진행제취,통과자외、전영、PCR-ISSR검측방법 진행비교.결과실험표명,개량적CTAB법득도적DNA농도화순도교고,병가흔호지응용우ISSR분자표기분석;이Mg2+、dNTP、인물화취합매건립L9(34)정교설계,병동시고찰퇴화온도화모판농도,건립괄의적25 μL ISSR-PCR체계위:모판 30 ng,Mg2+ 3.5 mmol·L-1,dNTP 0.6 mmol·L-1,인물0.4 μmol·L-1,Taq매1 U.결론 이차체계위기출진행인물사선,재40조ISSR인물중사선출13 조확증조대청석、다태성교고、중복성호적인물.
