河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
9期
121-124
,共4页
胡兴娟%王淑娜%周向阳%沈飚%贝文联%朱应伟
鬍興娟%王淑娜%週嚮暘%瀋飚%貝文聯%硃應偉
호흥연%왕숙나%주향양%침표%패문련%주응위
副溶血弧菌%霍乱弧菌%双重荧光定量PCR%水产品
副溶血弧菌%霍亂弧菌%雙重熒光定量PCR%水產品
부용혈호균%곽란호균%쌍중형광정량PCR%수산품
针对副溶血弧菌的tlh基因和霍乱弧菌的vcc基因,分别设计特异性引物与TaqMan探针,建立检测水产品中2种细菌的双重荧光定量PCR体系,并进行了特异性与敏感性试验.结果表明,在相同反应条件下,副溶血弧菌和霍乱弧菌得到了特异性扩增,而与其共存于水产品中的其他细菌均未见扩增.将不同比例的DNA混合后检测发现,2种荧光信号的收集不存在相互干扰.副溶血弧菌FJ14和霍乱弧菌H4的敏感性试验结果表明,该体系的最低DNA检测量分别为0.25 pg、0.32 pg,人工染菌样品的最低检测限分别为34 cfu/mL和153 cfu/mL.与传统检测方法相比,该双重荧光定量PCR方法检测水产品中的副溶血弧菌和霍乱弧菌快速准确,结果直观.
針對副溶血弧菌的tlh基因和霍亂弧菌的vcc基因,分彆設計特異性引物與TaqMan探針,建立檢測水產品中2種細菌的雙重熒光定量PCR體繫,併進行瞭特異性與敏感性試驗.結果錶明,在相同反應條件下,副溶血弧菌和霍亂弧菌得到瞭特異性擴增,而與其共存于水產品中的其他細菌均未見擴增.將不同比例的DNA混閤後檢測髮現,2種熒光信號的收集不存在相互榦擾.副溶血弧菌FJ14和霍亂弧菌H4的敏感性試驗結果錶明,該體繫的最低DNA檢測量分彆為0.25 pg、0.32 pg,人工染菌樣品的最低檢測限分彆為34 cfu/mL和153 cfu/mL.與傳統檢測方法相比,該雙重熒光定量PCR方法檢測水產品中的副溶血弧菌和霍亂弧菌快速準確,結果直觀.
침대부용혈호균적tlh기인화곽란호균적vcc기인,분별설계특이성인물여TaqMan탐침,건립검측수산품중2충세균적쌍중형광정량PCR체계,병진행료특이성여민감성시험.결과표명,재상동반응조건하,부용혈호균화곽란호균득도료특이성확증,이여기공존우수산품중적기타세균균미견확증.장불동비례적DNA혼합후검측발현,2충형광신호적수집불존재상호간우.부용혈호균FJ14화곽란호균H4적민감성시험결과표명,해체계적최저DNA검측량분별위0.25 pg、0.32 pg,인공염균양품적최저검측한분별위34 cfu/mL화153 cfu/mL.여전통검측방법상비,해쌍중형광정량PCR방법검측수산품중적부용혈호균화곽란호균쾌속준학,결과직관.
