生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
11期
166-170,176
,共6页
筛选%耐盐根瘤菌%TAIL-PCR%耐盐基因
篩選%耐鹽根瘤菌%TAIL-PCR%耐鹽基因
사선%내염근류균%TAIL-PCR%내염기인
通过大量筛选得到一株高耐盐的豇豆根瘤菌WME7,最高可耐15 g/L NaCl,利用Tn5-sacB转座子对该菌株进行随机插入突变,从突变子中筛选获得30个共生缺陷型突变株.利用TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)方法克隆了突变株Tn5-sacB侧翼序列,通过BLAST发现有1个突变株的插入失活基因与鼠伤寒沙门氏菌抗银的结合蛋白SilE有94%同源性,表明有关Na+离子的抗性基因可能与Ag+离子的抗性基因有某种关系.该基因在其它菌中也能抗其它金属离子(铜、锌、钴、铬).
通過大量篩選得到一株高耐鹽的豇豆根瘤菌WME7,最高可耐15 g/L NaCl,利用Tn5-sacB轉座子對該菌株進行隨機插入突變,從突變子中篩選穫得30箇共生缺陷型突變株.利用TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)方法剋隆瞭突變株Tn5-sacB側翼序列,通過BLAST髮現有1箇突變株的插入失活基因與鼠傷寒沙門氏菌抗銀的結閤蛋白SilE有94%同源性,錶明有關Na+離子的抗性基因可能與Ag+離子的抗性基因有某種關繫.該基因在其它菌中也能抗其它金屬離子(銅、鋅、鈷、鉻).
통과대량사선득도일주고내염적강두근류균WME7,최고가내15 g/L NaCl,이용Tn5-sacB전좌자대해균주진행수궤삽입돌변,종돌변자중사선획득30개공생결함형돌변주.이용TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)방법극륭료돌변주Tn5-sacB측익서렬,통과BLAST발현유1개돌변주적삽입실활기인여서상한사문씨균항은적결합단백SilE유94%동원성,표명유관Na+리자적항성기인가능여Ag+리자적항성기인유모충관계.해기인재기타균중야능항기타금속리자(동、자、고、락).