CAJ | 학술논문

目的探讨喹诺酮酰腙类化合物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用.方法用不同浓度的对甲氧基肉桂醛左氧氟酰腙(FQ-10)与SMMC-7721细胞体外培养.MTT法检测FQ-10对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用; Hoechst 33258/PI双染荧光染色法、TUNEL法及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡变化;高内涵活细胞成像系统测定细胞线粒体膜电位(△ψm)变化;Western blot方法测定caspase-9、caspase-8、caspase-3、p53、Bcl-2、Bax 蛋白表达.结果 FQ-10在0.625～10.00 μmol·L-1的浓度范围能抑制细胞增殖,呈时间、浓度依赖性;作用于细胞24 h的IC50值是4.40 μmol·L-1;各组FQ-10作用24 h后,细胞凋亡率高于对照组(P<0.05);琼脂糖凝胶电泳可见凋亡细胞典型的梯状DNA条带,并伴有线粒体膜电位降低.荧光染色观察细胞形态学变化,显示凋亡细胞染色质凝集,细胞核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化,晚期凋亡细胞可见特异性PI染色.与对照组比较,FQ-10作用后p53、Bax、caspase-9、caspase-3蛋白表达量增加,其中caspase-9、caspase-3活性裂解片段明显增加,caspase-8无变化,而Bcl-2蛋白表达水平下降.结论对甲氧基肉桂醛左氧氟酰腙能够激活线粒体凋亡通路,诱导人肝癌细胞凋亡.
목적 탐토규낙동선종류화합물유도인간암SMMC-7721세포조망적작용.방법 용불동농도적대갑양기육계철좌양불선종(FQ-10)여SMMC-7721세포체외배양.MTT법검측FQ-10대SMMC-7721세포적증식억제작용; Hoechst 33258/PI쌍염형광염색법、TUNEL법급경지당응효전영검측세포조망변화;고내함활세포성상계통측정세포선립체막전위(△ψm)변화;Western blot방법측정caspase-9、caspase-8、caspase-3、p53、Bcl-2、Bax 단백표체.결과 FQ-10재0.625～10.00 μmol·L-1적농도범위능억제세포증식,정시간、농도의뢰성;작용우세포24 h적IC50치시4.40 μmol·L-1;각조FQ-10작용24 h후,세포조망솔고우대조조(P<0.05);경지당응효전영가견조망세포전형적제상DNA조대,병반유선립체막전위강저.형광염색관찰세포형태학변화,현시조망세포염색질응집,세포핵쇄렬성쇄편등전형세포조망특정성변화,만기조망세포가견특이성PI염색.여대조조비교,FQ-10작용후p53、Bax、caspase-9、caspase-3단백표체량증가,기중caspase-9、caspase-3활성렬해편단명현증가,caspase-8무변화,이Bcl-2단백표체수평하강.결론 대갑양기육계철좌양불선종능구격활선립체조망통로,유도인간암세포조망.