基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2012年
4期
369-374
,共6页
蒋凤兵%阎文婷%朱勇%王斌%马艳妮%余佳%施琼
蔣鳳兵%閻文婷%硃勇%王斌%馬豔妮%餘佳%施瓊
장봉병%염문정%주용%왕빈%마염니%여가%시경
红系分化%EKLF%miR-96%染色质免疫共沉淀
紅繫分化%EKLF%miR-96%染色質免疫共沉澱
홍계분화%EKLF%miR-96%염색질면역공침정
目的 研究红系分化过程中,红系分化特异转录因子EKLF对miR-96的表达调控.方法 氯化高铁血红素(Hemin)诱导人K562细胞(人红白血病细胞系)向红系分化,real-time PCR检测miR-96表达.生物信息学分析miR-96转录起始点上游可能的EKLF结合位点.并经染色质免疫共沉淀(ChIP)与双荧光报告基因实验验证EKLF与这些位点结合的生物学意义.结果 Hemin诱导K562细胞向红系分化过程中,miR-96表达显著升高,且在48h表达最高(3.94±0.64,P＜0.05).生物信息学分析显示miR-96转录起始位点上游2.0 kb内含有多个EKLF结合位点.经ChIP验证这些位点有EKLF的结合,且EKLF与这些位点结合能募集RNA聚合酶Ⅱ(PolⅡ)结合,起始转录.进一步的双荧光报告基因实验也证明EKLF对miR-96转录起始点上游序列具有转录激活作用.结论 EKLF转录激活miR-96在红系分化过程中的表达.
目的 研究紅繫分化過程中,紅繫分化特異轉錄因子EKLF對miR-96的錶達調控.方法 氯化高鐵血紅素(Hemin)誘導人K562細胞(人紅白血病細胞繫)嚮紅繫分化,real-time PCR檢測miR-96錶達.生物信息學分析miR-96轉錄起始點上遊可能的EKLF結閤位點.併經染色質免疫共沉澱(ChIP)與雙熒光報告基因實驗驗證EKLF與這些位點結閤的生物學意義.結果 Hemin誘導K562細胞嚮紅繫分化過程中,miR-96錶達顯著升高,且在48h錶達最高(3.94±0.64,P＜0.05).生物信息學分析顯示miR-96轉錄起始位點上遊2.0 kb內含有多箇EKLF結閤位點.經ChIP驗證這些位點有EKLF的結閤,且EKLF與這些位點結閤能募集RNA聚閤酶Ⅱ(PolⅡ)結閤,起始轉錄.進一步的雙熒光報告基因實驗也證明EKLF對miR-96轉錄起始點上遊序列具有轉錄激活作用.結論 EKLF轉錄激活miR-96在紅繫分化過程中的錶達.
목적 연구홍계분화과정중,홍계분화특이전록인자EKLF대miR-96적표체조공.방법 록화고철혈홍소(Hemin)유도인K562세포(인홍백혈병세포계)향홍계분화,real-time PCR검측miR-96표체.생물신식학분석miR-96전록기시점상유가능적EKLF결합위점.병경염색질면역공침정(ChIP)여쌍형광보고기인실험험증EKLF여저사위점결합적생물학의의.결과 Hemin유도K562세포향홍계분화과정중,miR-96표체현저승고,차재48h표체최고(3.94±0.64,P＜0.05).생물신식학분석현시miR-96전록기시위점상유2.0 kb내함유다개EKLF결합위점.경ChIP험증저사위점유EKLF적결합,차EKLF여저사위점결합능모집RNA취합매Ⅱ(PolⅡ)결합,기시전록.진일보적쌍형광보고기인실험야증명EKLF대miR-96전록기시점상유서렬구유전록격활작용.결론 EKLF전록격활miR-96재홍계분화과정중적표체.
