生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
3期
393-396,422
,共5页
张立春%刘晓辉%曹阳%于永生%朴庆林%金海国%王晓阳
張立春%劉曉輝%曹暘%于永生%樸慶林%金海國%王曉暘
장립춘%류효휘%조양%우영생%박경림%금해국%왕효양
Fat-1基因%线虫%密码子优化%载体构建
Fat-1基因%線蟲%密碼子優化%載體構建
Fat-1기인%선충%밀마자우화%재체구건
目的:为使线虫Fat-Ⅰ基因能够在牛中高效表达,通过密码子优化及全基因合成方法制备Fat-1基因,并构建其转基因表达载体.方法:通过生物信息学手段,将来源于线虫的Fat-1基因以牛为表达宿主进行密码子优化,将优化后的Fat-1基因命名为bFat-1；通过全基因合成方法获得bFat-1基因,构建pcDNA3,1-bFat-Ⅰ真核表达载体.结果:通过密码子优化,影响Fat-Ⅰ基因在牛中表达的密码子适应指数、优势密码子频率及GC含量等各项指标均有显著改善；全基因合成、克隆及测序结果显示已获得bFat-1基因；构建并鉴定了pcDNA3.1-bFat-1载体.结论:获得了适合牛体表达的Fat-1基因并构建了其转基因载体,为获得高效表达Fat-1基因的转基因牛细胞系奠定了基础.
目的:為使線蟲Fat-Ⅰ基因能夠在牛中高效錶達,通過密碼子優化及全基因閤成方法製備Fat-1基因,併構建其轉基因錶達載體.方法:通過生物信息學手段,將來源于線蟲的Fat-1基因以牛為錶達宿主進行密碼子優化,將優化後的Fat-1基因命名為bFat-1；通過全基因閤成方法穫得bFat-1基因,構建pcDNA3,1-bFat-Ⅰ真覈錶達載體.結果:通過密碼子優化,影響Fat-Ⅰ基因在牛中錶達的密碼子適應指數、優勢密碼子頻率及GC含量等各項指標均有顯著改善；全基因閤成、剋隆及測序結果顯示已穫得bFat-1基因；構建併鑒定瞭pcDNA3.1-bFat-1載體.結論:穫得瞭適閤牛體錶達的Fat-1基因併構建瞭其轉基因載體,為穫得高效錶達Fat-1基因的轉基因牛細胞繫奠定瞭基礎.
목적:위사선충Fat-Ⅰ기인능구재우중고효표체,통과밀마자우화급전기인합성방법제비Fat-1기인,병구건기전기인표체재체.방법:통과생물신식학수단,장래원우선충적Fat-1기인이우위표체숙주진행밀마자우화,장우화후적Fat-1기인명명위bFat-1；통과전기인합성방법획득bFat-1기인,구건pcDNA3,1-bFat-Ⅰ진핵표체재체.결과:통과밀마자우화,영향Fat-Ⅰ기인재우중표체적밀마자괄응지수、우세밀마자빈솔급GC함량등각항지표균유현저개선；전기인합성、극륭급측서결과현시이획득bFat-1기인；구건병감정료pcDNA3.1-bFat-1재체.결론:획득료괄합우체표체적Fat-1기인병구건료기전기인재체,위획득고효표체Fat-1기인적전기인우세포계전정료기출.
