中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2005年
3期
186-193
,共8页
欧绍武%龟山亚砂子%郝丽英%龟山正树%李金鸣
歐紹武%龜山亞砂子%郝麗英%龜山正樹%李金鳴
구소무%구산아사자%학려영%구산정수%리금명
神经母细胞瘤%细胞,培养的%钠通道%基因%克隆,分子
神經母細胞瘤%細胞,培養的%鈉通道%基因%剋隆,分子
신경모세포류%세포,배양적%납통도%기인%극륭,분자
目的为了弄清人神经母细胞瘤(NB-1)细胞上的鲀毒素抵抗型(TTX-R)电压依赖性钠通道的编码基因及分子特性.方法使用逆转录聚合酶链反应方法,对NB-1细胞TTX-R钠通道α亚单位进行克隆.结果该克隆命名为hNbR1, 其开放阅读框架(ORF)为2016个氨基酸残基.序列分析显示,hNbR1与心肌Nav1.5/SCN5A氨基酸相似性达99.1%,并具有电压依赖性钠通道的结构特点.4个相似的跨膜结构域(DⅠ~DⅣ),其中包括6个推定的α螺旋跨膜片段(S1~S6),每个结构域的电压感受器跨膜片段(S4)均有正电荷残基;在DⅠ的P-环存在的半胱氨酸残基(C373)提示该通道为TTX-R钠通道. DⅠS3~S4一个位于第3号染色体的新的外显子(第6A外显子)编码了该通道α亚单位.另外,一个删除了DⅡ~DⅢ第18外显子的选择性剪切体(hNbR1-2)被发现.结论Nav1.5/SCN5A比以往所知具有更加广泛的分布,而且发现一个新的外显子在神经肿瘤组织中编码了这个TTX-R钠通道的α-亚单位.
目的為瞭弄清人神經母細胞瘤(NB-1)細胞上的鲀毒素牴抗型(TTX-R)電壓依賴性鈉通道的編碼基因及分子特性.方法使用逆轉錄聚閤酶鏈反應方法,對NB-1細胞TTX-R鈉通道α亞單位進行剋隆.結果該剋隆命名為hNbR1, 其開放閱讀框架(ORF)為2016箇氨基痠殘基.序列分析顯示,hNbR1與心肌Nav1.5/SCN5A氨基痠相似性達99.1%,併具有電壓依賴性鈉通道的結構特點.4箇相似的跨膜結構域(DⅠ~DⅣ),其中包括6箇推定的α螺鏇跨膜片段(S1~S6),每箇結構域的電壓感受器跨膜片段(S4)均有正電荷殘基;在DⅠ的P-環存在的半胱氨痠殘基(C373)提示該通道為TTX-R鈉通道. DⅠS3~S4一箇位于第3號染色體的新的外顯子(第6A外顯子)編碼瞭該通道α亞單位.另外,一箇刪除瞭DⅡ~DⅢ第18外顯子的選擇性剪切體(hNbR1-2)被髮現.結論Nav1.5/SCN5A比以往所知具有更加廣汎的分佈,而且髮現一箇新的外顯子在神經腫瘤組織中編碼瞭這箇TTX-R鈉通道的α-亞單位.
목적위료롱청인신경모세포류(NB-1)세포상적돈독소저항형(TTX-R)전압의뢰성납통도적편마기인급분자특성.방법사용역전록취합매련반응방법,대NB-1세포TTX-R납통도α아단위진행극륭.결과해극륭명명위hNbR1, 기개방열독광가(ORF)위2016개안기산잔기.서렬분석현시,hNbR1여심기Nav1.5/SCN5A안기산상사성체99.1%,병구유전압의뢰성납통도적결구특점.4개상사적과막결구역(DⅠ~DⅣ),기중포괄6개추정적α라선과막편단(S1~S6),매개결구역적전압감수기과막편단(S4)균유정전하잔기;재DⅠ적P-배존재적반광안산잔기(C373)제시해통도위TTX-R납통도. DⅠS3~S4일개위우제3호염색체적신적외현자(제6A외현자)편마료해통도α아단위.령외,일개산제료DⅡ~DⅢ제18외현자적선택성전절체(hNbR1-2)피발현.결론Nav1.5/SCN5A비이왕소지구유경가엄범적분포,이차발현일개신적외현자재신경종류조직중편마료저개TTX-R납통도적α-아단위.