武汉大学学报（医学版）
武漢大學學報（醫學版）
무한대학학보（의학판）
MEDICAL JOURNAL WUHAN UNIVERSITY
2007年
1期
40-43
,共4页
贾俊%赵怡芳%张文峰%何三纲
賈俊%趙怡芳%張文峰%何三綱
가준%조이방%장문봉%하삼강
细胞培养%细胞周期%细胞周期蛋白质%蛋白质P53%蛋白质P21
細胞培養%細胞週期%細胞週期蛋白質%蛋白質P53%蛋白質P21
세포배양%세포주기%세포주기단백질%단백질P53%단백질P21
目的:探讨SV40 T抗原促进鼠内皮细胞增殖动力改变的机制,为基因治疗转化细胞提供理论依据. 方法:用含有SV40 T抗原的表达质粒(pRNS-1)转染大鼠主动脉内皮细胞,经G418加压筛选,获得阳性克隆后扩增培养.在光镜下观察转染前后细胞的形态和生长特性;流式细胞仪检测细胞增殖周期; PCR检测外源基因的整合;免疫组化蛋白水平检测SV40 T抗原的表达;Western blot检测周期素(Cyclin)D1、P53和P21的表达.结果: 转染后的鼠内皮细胞体外生存期延长,大量细胞由G1期进入S期,对血清和生长因子的依赖性降低.与转染前的细胞相比,转染后的鼠内皮细胞表达更多的P53和Cyclin D1, P21表达量降低.结论:SV40 T抗原可能通过调节Cyclin D1、P53和P21的表达来影响鼠内皮细胞的增殖.
目的:探討SV40 T抗原促進鼠內皮細胞增殖動力改變的機製,為基因治療轉化細胞提供理論依據. 方法:用含有SV40 T抗原的錶達質粒(pRNS-1)轉染大鼠主動脈內皮細胞,經G418加壓篩選,穫得暘性剋隆後擴增培養.在光鏡下觀察轉染前後細胞的形態和生長特性;流式細胞儀檢測細胞增殖週期; PCR檢測外源基因的整閤;免疫組化蛋白水平檢測SV40 T抗原的錶達;Western blot檢測週期素(Cyclin)D1、P53和P21的錶達.結果: 轉染後的鼠內皮細胞體外生存期延長,大量細胞由G1期進入S期,對血清和生長因子的依賴性降低.與轉染前的細胞相比,轉染後的鼠內皮細胞錶達更多的P53和Cyclin D1, P21錶達量降低.結論:SV40 T抗原可能通過調節Cyclin D1、P53和P21的錶達來影響鼠內皮細胞的增殖.
목적:탐토SV40 T항원촉진서내피세포증식동력개변적궤제,위기인치료전화세포제공이론의거. 방법:용함유SV40 T항원적표체질립(pRNS-1)전염대서주동맥내피세포,경G418가압사선,획득양성극륭후확증배양.재광경하관찰전염전후세포적형태화생장특성;류식세포의검측세포증식주기; PCR검측외원기인적정합;면역조화단백수평검측SV40 T항원적표체;Western blot검측주기소(Cyclin)D1、P53화P21적표체.결과: 전염후적서내피세포체외생존기연장,대량세포유G1기진입S기,대혈청화생장인자적의뢰성강저.여전염전적세포상비,전염후적서내피세포표체경다적P53화Cyclin D1, P21표체량강저.결론:SV40 T항원가능통과조절Cyclin D1、P53화P21적표체래영향서내피세포적증식.
