CAJ | 학술논문

目的:探讨Mcl-1在二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病HL-60细胞周期阻滞过程中的作用.方法:CCK-8检测DADS抑制HL-60细胞的作用;流式细胞术观察DADS对HL-60细胞的周期阻滞效应;West-ern blotting分析DADS处理HL-60细胞后Mcl-1、PCNA(细胞核增殖抗原)、CDK1(周期依赖激酶1)表达情况;RNAi干扰Mcl-1观察Mcl-1对白血病细胞周期的影响;免疫共沉淀分析Mcl-1与PCNA、CDK1结合作用.结果:CCK-8比色结果显示,15、30、60、120、240 μmol/L DADS处理HL-60细胞,细胞增殖抑制率分别为31.15%、55.88%、66.14%、75.29%、80.35%,呈浓度依赖性增加(P<0.05).流式细胞术检测显示,60 μmol/L和120μmol/L DADS作用HL-60细胞24 h和48 h后,呈时间和浓度依赖性诱导HL-60细胞G2/M期阻滞(P<0.05).Western blotting分析发现60 μmol/LDADS处理HL-60细胞后PCNA、Mcl-1、CDK1表达下调(P<0.05).Mcl-1基因沉默24 h后G2/M期百分率增加到19.4%,与对照组比较有显著差异(P<0.05).而Mcl-1基因沉默后加入60 μmol/LDADS作用时,G2/M期百分率比60 μmol/L DADS处理组增加6.0%(P<0.05).免疫共沉淀发现,HL-60细胞中存在Mcl-1与PCNA、CDK1的相互结合,DADS处理HL-60细胞后Mcl-1与PCNA、CDK1的结合作用减弱.结论:DADS能诱导HL-60细胞增殖抑制和G2/M阻滞,其抑制增殖作用与PCNA表达下调有关.Mcl-1基因沉默可增强DADS对HL-60细胞G2/M期阻滞作用.
목적:탐토Mcl-1재이희병기이류(DADS)유도인백혈병HL-60세포주기조체과정중적작용.방법:CCK-8검측DADS억제HL-60세포적작용;류식세포술관찰DADS대HL-60세포적주기조체효응;West-ern blotting분석DADS처리HL-60세포후Mcl-1、PCNA(세포핵증식항원)、CDK1(주기의뢰격매1)표체정황;RNAi간우Mcl-1관찰Mcl-1대백혈병세포주기적영향;면역공침정분석Mcl-1여PCNA、CDK1결합작용.결과:CCK-8비색결과현시,15、30、60、120、240 μmol/L DADS처리HL-60세포,세포증식억제솔분별위31.15%、55.88%、66.14%、75.29%、80.35%,정농도의뢰성증가(P<0.05).류식세포술검측현시,60 μmol/L화120μmol/L DADS작용HL-60세포24 h화48 h후,정시간화농도의뢰성유도HL-60세포G2/M기조체(P<0.05).Western blotting분석발현60 μmol/LDADS처리HL-60세포후PCNA、Mcl-1、CDK1표체하조(P<0.05).Mcl-1기인침묵24 h후G2/M기백분솔증가도19.4%,여대조조비교유현저차이(P<0.05).이Mcl-1기인침묵후가입60 μmol/LDADS작용시,G2/M기백분솔비60 μmol/L DADS처리조증가6.0%(P<0.05).면역공침정발현,HL-60세포중존재Mcl-1여PCNA、CDK1적상호결합,DADS처리HL-60세포후Mcl-1여PCNA、CDK1적결합작용감약.결론:DADS능유도HL-60세포증식억제화G2/M조체,기억제증식작용여PCNA표체하조유관.Mcl-1기인침묵가증강DADS대HL-60세포G2/M기조체작용.