畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
2期
177-181
,共5页
郑惠玲%杨振宇%祝珍珍%安俊辉%邢瑞芳
鄭惠玲%楊振宇%祝珍珍%安俊輝%邢瑞芳
정혜령%양진우%축진진%안준휘%형서방
甲状旁腺相关肽%原核表达%多克隆抗体%组织表达图谱%山羊
甲狀徬腺相關肽%原覈錶達%多剋隆抗體%組織錶達圖譜%山羊
갑상방선상관태%원핵표체%다극륭항체%조직표체도보%산양
旨在获得山羊PTHrP多克隆抗体,检测其在山羊各组织中的表达图谱,以便进一步研究山羊PTHrP的功能.本研究构建山羊PTHrP基因的原核表达载体,转化E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达获得融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测融合蛋白,然后将融合蛋白纯化后多点免疫大耳白兔,制备多克隆抗体,最后使用Western blot检测PTHrP在山羊各组织中的表达.结果,酶切和测序显示原核表达载体构建成功;SDS-PAGE电泳结果说明融合蛋白(约36.5 ku)被成功纯化;间接ELISA检测所制备的抗体效价达1∶51 200;表达谱显示PTHrP在山羊乳腺、肾脏、垂体、脑、心脏、肝脏、骨、肌肉、脾脏等组织中均有表达.本研究成功制备了山羊PTHrP的多克隆抗体,发现PTHrP在山羊各组织中广泛表达.
旨在穫得山羊PTHrP多剋隆抗體,檢測其在山羊各組織中的錶達圖譜,以便進一步研究山羊PTHrP的功能.本研究構建山羊PTHrP基因的原覈錶達載體,轉化E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG誘導錶達穫得融閤蛋白,SDS-PAGE電泳檢測融閤蛋白,然後將融閤蛋白純化後多點免疫大耳白兔,製備多剋隆抗體,最後使用Western blot檢測PTHrP在山羊各組織中的錶達.結果,酶切和測序顯示原覈錶達載體構建成功;SDS-PAGE電泳結果說明融閤蛋白(約36.5 ku)被成功純化;間接ELISA檢測所製備的抗體效價達1∶51 200;錶達譜顯示PTHrP在山羊乳腺、腎髒、垂體、腦、心髒、肝髒、骨、肌肉、脾髒等組織中均有錶達.本研究成功製備瞭山羊PTHrP的多剋隆抗體,髮現PTHrP在山羊各組織中廣汎錶達.
지재획득산양PTHrP다극륭항체,검측기재산양각조직중적표체도보,이편진일보연구산양PTHrP적공능.본연구구건산양PTHrP기인적원핵표체재체,전화E.coli BL21(DE3)균주,IPTG유도표체획득융합단백,SDS-PAGE전영검측융합단백,연후장융합단백순화후다점면역대이백토,제비다극륭항체,최후사용Western blot검측PTHrP재산양각조직중적표체.결과,매절화측서현시원핵표체재체구건성공;SDS-PAGE전영결과설명융합단백(약36.5 ku)피성공순화;간접ELISA검측소제비적항체효개체1∶51 200;표체보현시PTHrP재산양유선、신장、수체、뇌、심장、간장、골、기육、비장등조직중균유표체.본연구성공제비료산양PTHrP적다극륭항체,발현PTHrP재산양각조직중엄범표체.
